| 同时检测新甲型H1N1及人季节性H1N1和H3N2流感病毒的单管多重荧光定量PCR方法 |
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| 引用本文： | 秦萌,王大燕,黄芳,聂凯,曲梅,王淼,韩峰,赵翔,成艳辉,舒跃龙,马学军.同时检测新甲型H1N1及人季节性H1N1和H3N2流感病毒的单管多重荧光定量PCR方法[J].病毒学报,2010,26(2). |
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| 作者姓名： | 秦萌 王大燕 黄芳 聂凯 曲梅 王淼 韩峰 赵翔 成艳辉 舒跃龙 马学军 |
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| 作者单位： | 中国疾病预防控制中心,病毒病预防控制所,病毒基因工程国家重点实验室,北京,100052;北京市疾病预防控制中心传染病地方病控制所,北京,100013 |
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| 基金项目： | 国家传染病防治科技重大专项 |
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| 摘 要： | 本研究设计的一种4重荧光定量RT-PCR检测方法,以A型流感病毒各亚型的血凝素基因(HA)为检测靶标,实现了同时检测新甲型H1N1流感病毒、人季节性H1N1流感病毒和人季节性H3N2流感病毒。本法使用人细胞RNA酶P基因作为内参,以判断标本来源和实施质量控制。利用不同来源和亚型的流感病毒验证了该方法的特异性;利用连续稀释的新甲型H1N1流感病毒HA全基因体外转录物进行灵敏度分析。结果表明该方法灵敏度高,可检测低至20个拷贝的RNA;特异性强,每对引物只检测出对应的病毒,无交叉反应;并且成功地验证性检验了34份新甲型H1N1流感病毒阳性临床标本和20份人季节性H1N1和H3N2流感病毒及人乙型(HB)流感病毒阳性临床标本。因此,该多重荧光定量RT-PCR法是一种可同时检测2009年新甲型流感病毒及季节性流感病毒的有效方法。
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| 关 键 词： | 新甲型H1N1 实时定量PCR 多重检测 |
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