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云南蚊虫中阿卡斑病毒的分离和鉴定
引用本文:冯云,何彪,付士红,杨卫红,章域震,涂长春,梁国栋,张海林.云南蚊虫中阿卡斑病毒的分离和鉴定[J].病毒学报,2015,31(1):51-57.
作者姓名:冯云  何彪  付士红  杨卫红  章域震  涂长春  梁国栋  张海林
作者单位:云南省地方病防治所,大理,671000;军事医学科学院军事兽医研究所,长春,130062;中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所,北京,102206
基金项目:中美新发和再发传染病合作项目(U19-GH000004);NSFC-云南省联合资助基金/重点项目(No.U1036601);
摘    要:为掌握云南省德宏州芒市和瑞丽市蚊媒病毒分布状况,2010年8月用诱蚊灯采集蚊虫17种2 149只,用金黄地鼠肾细胞(Baby hamster kidney cell,BHK-21)培养法分离病毒,阳性分离物用阿卡斑病毒(Akabane virus,AKV)S和M片段特异性引物的RT-PCR法鉴定。从采集蚊虫中分离到能引起BHK-21细胞病变和致乳小白鼠发病死亡的2株病毒,其中DHL10M110株分离自瑞丽市迷糊按蚊(Anopheles vagas),DHL10M117株分离自芒市三带喙库蚊(Culex tritaeniorhynchus)。RT-PCR扩增获得S片段的702bp序列和M片段的456bp序列,系统进化树分析表明DHL10M110和DHL10M117株与肯尼亚和澳大利亚AKV分离株进化关系较远;与日本、韩国和中国台湾的AKV分离株亲缘关系较近,但云南株形成一个独立的小分支。2株新分离病毒的S片段与中国台湾CY-77株的核苷酸(96.6%和96.7%)和氨基酸(99.6%和100%)同源性最高;M片段与日本Iriki株的核苷酸同源性最高(93.2%和93.6%),与中国台湾CY-77株氨基酸同源性最高(99.6%和100%);与肯尼亚MP496株核苷酸(69.7%和70.0%)和氨基酸(91.0%)同源性最低。本研究证实云南省德宏州存在AKV的流行,与亚洲流行株具有较近的亲缘关系。三带喙库蚊和迷糊按蚊可传播该病毒。

关 键 词:蚊虫  阿卡斑病毒  系统进化树  同源性分析
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