人乳头状瘤病毒诱导食管上皮永生化细胞的双相分化

研究中期永生化食管上皮细胞的表型，细胞遗传学和部份基因的改变，以阐明癌前病变的特征，SHEE是该院人人乳头状瘤病毒HPV18E6E7诱导的永生化上皮，传至61代已开始有少量细胞恶性转化。对永生化中期31代细胞用相差显微镜检查细胞形态改变和细胞生长状态（细胞接触和锚定生长）；流式细胞仪检测细胞周期；做染色体众数分析；多重PCR检查c-myc,p53,bcl-2和ras等基因。免疫组化检查细胞角蛋白和鬼臼毒素荧光标记检查肌动蛋白F（F－actin)。软琼脂培养的集落细胞接种SCID小鼠检查成瘤性。Western blot方法检测细胞内HPVE6表达蛋白。结果：培养细胞有两种不同分化形态，分化差的基底细胞和分化好的鳞状上皮；前者角蛋白和F－actin极少，后者含量丰富；细胞接触抑制和锚锭生长特性减弱，分析100个细胞染色体众数分二干系，56条（占30％）和61条（占24％）染色体，核型分析属上超二倍体，亚三倍体，多重PCR检查：c-myc,p53基因上调，bcl-2和ras基因阳性。用优选生长在软琼脂上的克隆细胞接种SCID小鼠，未成瘤；HPV18E6表达蛋白阳性。以HPV18E6E7诱导的食管永生化上皮31代细胞形态出现了双向分化，根据其形态表型，双染色体众数的细胞遗传学改变和某些癌基因上调等特性，可以认为SHEE31细胞是外处于癌前改变。

Biphasic Differentiation of Immortalized Esophageal Epithelium Induced by HPV18E6E7