利用酵母双杂交筛选与苹果褪绿叶斑病毒MP互作的寄主因子 |
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引用本文: | 何乙坤,钟敏,张瑜,王亚南,曹克强.利用酵母双杂交筛选与苹果褪绿叶斑病毒MP互作的寄主因子[J].病毒学报,2015,31(2). |
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作者姓名: | 何乙坤 钟敏 张瑜 王亚南 曹克强 |
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作者单位: | 河北农业大学植物保护学院,保定,071001;河北农业大学植物保护学院,保定,071001;河北农业大学植物保护学院,保定,071001;河北农业大学植物保护学院,保定,071001;河北农业大学植物保护学院,保定,071001 |
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基金项目: | 国家自然科学基金;河北省高等学校科学技术研究项目;国家现代苹果产业技术体系项目 |
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摘 要: | 为了找到与苹果褪绿叶斑病毒(Apple chlorotic leaf spot virus,ACLSV)运动蛋白(Movement protein,MP)互作的寄主因子,首先构建了ACLSV MP酵母双杂交诱饵载体,然后通过顺序转化的方法自前期已构建好的苏俄苹果(Malus sylvestris cv.R12740-7A)cDNA文库中筛选互作基因;在GenBank中对互作寄主基因进行BLAST分析,根据基因注释推测其在病毒与寄主互作过程中可能发挥的作用。结果表明,构建的酵母双杂交诱饵载体pGBKT7-MP无自激活性、无毒性。筛选到69个与ACLSV MP互作的苏俄苹果寄主因子,包括水解酶活性、病程相关蛋白、氧化还原酶活性、磷酸酶活性、催化活性、连接酶活性、苯丙氨酸解氨酶活性、过氧化物酶活性、DNA结合功能和未知蛋白,共10类不同功能的蛋白。通过生物信息学分析,推断蛋白磷酸酶、病程相关蛋白及3-磷酸甘油醛脱氢酶可能在互作过程中起重要作用。该研究为深入了解ACLSV致病特征及病原与寄主互作机制奠定基础。
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关 键 词: | 苹果褪绿叶斑病毒 苏俄苹果 酵母双杂交 互作基因 |
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