| 逆转录环介导等温核酸扩增技术(RT-LAMP)在H5N1禽流感病毒基因检测中的应用 |
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| 引用本文： | 李启明,马学军,高寒春,周蕊,匡治州,侯云德.逆转录环介导等温核酸扩增技术(RT-LAMP)在H5N1禽流感病毒基因检测中的应用[J].病毒学报,2008,24(3):178-184. |
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| 作者姓名： | 李启明 马学军 高寒春 周蕊 匡治州 侯云德 |
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| 作者单位： | 1. 中国疾病预防控制中心,病毒病预防控制所,病毒基因工程国家重点实验室,北京100052
2. 中国疾病预防控制中心,病毒病预防控制所,病毒基因工程国家重点实验室,北京100052;北京金迪克生物技术研究所,北京100176
3. 北京金迪克生物技术研究所,北京,100176 |
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| 摘 要： | 建立一种便捷、灵敏的检测方法,即逆转录环介导等温核酸扩增技术(RT-LAMP)用于H5N1亚型禽流感病毒基因检测.该技术使用特异对应于靶序列中8个基因区段的6条特异引物,在等温条件下进行核酸扩增反应.对51份实验感染动物及病毒培养标本的H5N1亚型禽流感病毒的HA、NA基因区进行了RT-LAMP检测,并以SYBR Green Ⅰ为反应指示剂进行了逆转录环介导等温核酸扩增技术,对该反应进行实时监控,经对扩增产物做内切酶验证和测序分析,证明RT-LAMP技术的特异性;同时,用10倍系列稀释的RNA样品对该检测方法的灵敏度进行了测试.结果显示:利用RT-LAMP技术成功检测到H5N1禽流感病毒的HA、NA基因区,且RT-LAMP与Real-time PCR结果呈现很好的一致性.此方法的灵敏度可达到能检测10个拷贝RNA分子水平.因此,RT-LAMP技术应用于H5N1亚型禽流感病毒的快速检测是一种可行的方法.
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| 关 键 词： | H5N1亚型禽流感病毒 逆转录环介导等温核酸扩增技术 实时监控 |
| 文章编号： | 1000-8721(2008)03-0178-07 |
| 修稿时间： | 2008年4月2日 |
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