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| 鸡传染性支气管炎病毒H株纤突蛋白S1基因的克隆及其在毕赤酵母中表达 | |
| 引用本文： | 黄亚东,郑青,李校堃,王林川,赵振芬,黄自然.鸡传染性支气管炎病毒H株纤突蛋白S1基因的克隆及其在毕赤酵母中表达[J].病毒学报,2003,19(2):144-148. |
| 作者姓名： | 黄亚东 郑青 李校堃 王林川 赵振芬 黄自然 |
| 作者单位： | 1. 暨南大学医药生物技术研究开发中心,广州,510632 2. 华南农业大学,动物医学系,广州,510642 3. 郑州牧业工程高等专科学校,郑州,450008 4. 华南农业大学,蚕桑系,广州,510642 |
| 基金项目： | 广东省青年基金;950416; |
| 摘 要： | 鸡传染性支气管炎病毒(IBV)河南分离株H，经SPF鸡胚增殖，差速离心纯化病毒，SDS-蛋白酶K法抽提病毒RNA。参照IBV Bcaudette株纤突蛋白S1基因序列设计并合成引物，以其进行RT—PCR，成功地扩增出IBV H株S1基因。扩增产物经Bst YⅠ Hae Ⅲ和Pst Ⅰ酶切分析，结果表明，IBV H株S1基因的RFLP图谱与M41株S1基因的完全一致，初步断定IBV H株为Mass血清型。将IBVH株S1基因克隆于pGEM—T载体中进行序列分析，结果表明该基因全长为1611bp(从ATG到S前体蛋白裂解位点)，与标准株M41和Beaudette的S1基因序列相比较，同源率分别达到97．39％和97、27％。将IBV H株S1基因亚克隆到pPICZ—A表达载体，转化毕赤酵母中，SDS—PAGE实验证实了IBV H株S1基因在毕赤酵母中得以表达，进一步用鸡抗IBV血清做Westernblot检测．证实了表达产物的抗原特异性。 |
| 关 键 词： | 鸡传染性支气管炎病毒 纤突蛋白S1基因 克隆 毕赤酵母 表达 |
| 文章编号： | 1000-8721(2003)02-0144-05 |
Cloning of Spike Protein S1 Gene of Avian Infectious Bronchitis Virus H Strain and Its Expression in Pichia pastoris |
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| Abstract: | |
| Keywords: | avian infectious bronchitis virus(IBV) spike protein S1 gene cloning pichia pastoris expression |
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