| PRRSV非结构蛋白Nsp2PL2域结构及其去泛素化酶功能 |
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| 引用本文： | 张蕾,洪文姣,张丽琳,黎瑞巧,苏彦鑫,赵成雪,芦冬,刘贤明,黄金海.PRRSV非结构蛋白Nsp2PL2域结构及其去泛素化酶功能[J].病毒学报,2018,34(4):533-540. |
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| 作者姓名： | 张蕾 洪文姣 张丽琳 黎瑞巧 苏彦鑫 赵成雪 芦冬 刘贤明 黄金海 |
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| 作者单位： | 天津大学生命科学学院,天津,300072;天津大学生命科学学院,天津,300072;天津大学生命科学学院,天津,300072;天津大学生命科学学院,天津,300072;天津大学生命科学学院,天津,300072;天津大学生命科学学院,天津,300072;天津大学生命科学学院,天津,300072;天津大学生命科学学院,天津,300072;天津大学生命科学学院,天津,300072 |
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| 基金项目： | 16YFZCNC00640);国家重点研发项目;题目;17JCZDJC33900) |
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| 摘 要： | 为了解PRRSV非结构蛋白Nsp2的PL2域结构及功能,本研究通过构建PL2、PL2融合Ub的Strep标签的原核表达质粒,表达获得纯度95%以上的蛋白,进行结晶。结果表明PRRSV PL2蛋白的聚集状态具有浓度依赖性,优化出短粗和长细两种晶型的蛋白晶体。通过细胞内外实验了解PL2的去泛素化酶特征。将纯化的Ub-PL2-Strep蛋白分别与K48、K63或KO(线性)泛素化的蛋白孵育,检测蛋白体外去泛素化酶活性;将构建的PL2真核表达载体与不同位点泛素质粒共转染以了解PL2去泛素化酶活性及作用模式。结果表明PL2蛋白具有去除K48、K63及线性泛素化修饰的广谱去泛素化酶作用。PL2蛋白高二硫键含量,多聚特性影响规则晶体及衍射图的形成。PL2蛋白结构及功能的研究为PRRSV致病机制及药物靶点的筛选提供了依据。
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| 关 键 词： | 猪繁殖与呼吸综合征(PRRSV) PL2域 蛋白结晶 去泛素化 |
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