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乙型肝炎表面抗原S-蛋白糖化位点序列的人工变异及其哺乳动物细胞表达产物的性状研究
引用本文:刘文军,杨芙蓉,阮力,任贵方,朱既明.乙型肝炎表面抗原S-蛋白糖化位点序列的人工变异及其哺乳动物细胞表达产物的性状研究[J].病毒学报,1997(1).
作者姓名:刘文军  杨芙蓉  阮力  任贵方  朱既明
作者单位:中国预防医学科学院病毒学研究所
摘    要:利用末端重叠PCR法和定点突变技术,获得了去除N-连接多糖结构的乙肝表面抗原S突变基因,将乙肝表面抗原S-蛋白中结合N-连多糖结构序列Asn-X-Thr中的第148苏氨酸的密码子ACT,改变为编码甘氨酸的密码子GGT。构建了该突变基因的表达载体并在CHO细胞中表达,筛选到两株表达水平较高的细胞系。对其中的一株细胞系C41的表达产物做了初步纯化和鉴定。纯化样品经SDS-PAGE电泳分析,只含有23kD一条蛋白带,而对照原基因CHO细胞的表达产物则含有23kD、27kD和30kD三条蛋白带,证实经人工修饰后其哺乳动物细胞表达产物不再含有糖基,纯化样品在电镜下可清楚地显示22nm的球形颗粒。单克隆抗体反应谱分析发现,CHO细胞表达的无糖HBsAg与含糖HBsAg的抗原表位存在明显差别。

关 键 词:乙型肝炎表面抗原,转化细胞系,免疫原性

EFFECT OF SITE DIRECTED REMOVAL OF N GLYCOSYLATION SITE OF HBsAg ON ITS BIOLOGICAL PROPERTIES
Liu Wenjun,Yang Furong,Ruan Li,Ren Guifang,Zhu Jiming.EFFECT OF SITE DIRECTED REMOVAL OF N GLYCOSYLATION SITE OF HBsAg ON ITS BIOLOGICAL PROPERTIES[J].Chinese Journal of Virology,1997(1).
Authors:Liu Wenjun  Yang Furong  Ruan Li  Ren Guifang  Zhu Jiming
Abstract:
Keywords:HBsAg  Transformed cell line  Immunogenicity
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