| 菊花SRAP-PCR反应体系的优化与确立 |
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| 引用本文： | 张飞,陈发棣,房伟民,李风童,刘浦生.菊花SRAP-PCR反应体系的优化与确立[J].植物资源与环境学报,2009,18(3):44-49. |
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| 作者姓名： | 张飞 陈发棣 房伟民 李风童 刘浦生 |
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| 作者单位： | 南京农业大学园艺学院,江苏,南京,210095 |
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| 基金项目： | 教育部新世纪优秀人才支持计划，"十一五"国家科技支撑计划项目 |
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| 摘 要： | 采用L16(45)正交实验设计,对SRAP-PCR反应体系中Mg2+ 、 dNTPs和引物浓度以及Taq DNA聚合酶和模板DNA用量等5个因素进行了优化,并确立了适合菊花Dendranthema×grandiflorum (Ramat.) Kitamura]SRAP-PCR的反应体系.菊花的SRAP-PCR最佳反应体系为:反应体系总体积20 μL,含3.125 mmol·L-1 Mg2+ 、187.5 μmol·L-1 dNTPs、10.0 μmol·L-1引物、50 ng模板DNA、0.5 U Taq DNA 聚合酶及1×PCR buffer.各因素对菊花基因组DNA SRAP-PCR扩增结果的影响程度不同,其中dNTPs浓度影响最大,Taq DNA聚合酶用量的影响最小.运用菊花品种'奥运含笑'和'雨花落英'及二者的F1杂交后代单株的基因组DNA对优化的SRAP-PCR反应体系进行验证,均获得了多态性丰富、条带清晰的扩增图谱,表明所确立的菊花SRAP-PCR反应体系稳定可靠.
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| 关 键 词： | 菊花 正交实验设计 反应体系优化 |
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