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衫木叶片蛋白质组的双向电泳技术优化
引用本文:杨梅,陈伟,林思祖,曹光球.衫木叶片蛋白质组的双向电泳技术优化[J].热带亚热带植物学报,2007,15(5):438-442.
作者姓名:杨梅  陈伟  林思祖  曹光球
作者单位:1. 广西大学林学院,南宁,530004;福建农林大学林学院,福州,350002
2. 福建农林大学生命科学学院,福州,350002
3. 福建农林大学林学院,福州,350002
基金项目:高等学校博士学科点专项科研项目;福建省自然科学基金;福建省农林大学森林培育重点学科项目
摘    要:为建立适用于杉木(Cunninghaimia lanceolata)叶片蛋白质组研究的双向电泳技术,对杉木叶片蛋白质的溶解方法、上样量、IEF及SDS-PAGE电泳等关键步骤进行了优化。结果表明,杉木叶片蛋白质主要分布在pH4-7范围;裂解液中含有硫脲(2mmol/L)才能较充分地溶解蛋白,DTT浓度为60mmol/L、上样量1.5mg时得到的图谱分辨率较好且蛋白斑点分布均匀、清晰,拖尾现象明显减少,平衡液Ⅱ中碘代乙酰胺浓度为450mg(15ml)-1时能提高图谱分辨率;采用与质谱兼容的考马斯亮兰进行染色,得到近700个蛋白点。

关 键 词:杉木  叶片  双向电泳  蛋白质组
文章编号:1005-3395(2007)05-0438-05
收稿时间:2006-09-11
修稿时间:2007-01-11

Optimization of Two-Dimensional Gel Electrophoresis for Proteome of Chinese Fir Leaves
YANG Mei,CHEN Wei,LIN Si-zu,CAO Guang-qiu.Optimization of Two-Dimensional Gel Electrophoresis for Proteome of Chinese Fir Leaves[J].Journal of Tropical and Subtropical Botany,2007,15(5):438-442.
Authors:YANG Mei  CHEN Wei  LIN Si-zu  CAO Guang-qiu
Institution:1. College of Forestry, Guangxi University, Nanning 530004, China; 2a. College of Forestry; 2b. College of Life Science, Fujian Agriculture and Forestry University, Fuzhou 350002, China
Abstract:A two-dimensional polyareylamide gel electrophoresis (2D-PAGE) system was established for proteomic study of Chinese fir (Cunninghaimia lanceolata) leaves. The results showh that the system containing lysis buffer with 2 mmol/L thiourea for complete dissolution of proteins, DTT 60 mmol/L, loaded proteins 1.5 mg for good protein patterns, equilibration liquid with 450 mg (15 ml)-1 iodoacetamide for high resolution patterns, colloidal coomassie blue compatible with mass spectrometer, was optimizated. More than 700 protein spots with pH 4-7 were detected.
Keywords:Chinese fir  Leaves  Two-dimensional polyareylamide gel electrophoresis  Proteome
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