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农杆菌介导佛手遗传转化主要影响因素的研究
引用本文:周春丽,郭卫东,路梅,陈瑾,李玉萍.农杆菌介导佛手遗传转化主要影响因素的研究[J].热带亚热带植物学报,2006,14(5):374-381.
作者姓名:周春丽  郭卫东  路梅  陈瑾  李玉萍
作者单位:1. 江西科技师范学院生命科学院,南昌,330013;西北农林科技大学园艺学院,陕西,杨凌,712100
2. 浙江师范大学环境与生命科学院,浙江,金华,321004
3. 江西科技师范学院生命科学院,南昌,330013
摘    要:采用根癌农杆菌介导的佛手叶盘转化法,在建立转海藻糖合酶基因(TPS)佛手体系过程中,对影响农杆菌转化频率的各种因素进行了研究。结果表明,佛手叶盘需在黑暗条件下MT培养基上预培养2-3d,与农杆菌共培养3d较合适;农杆菌菌液浓度OD600约为0.6-0.8,感染时间20min;抑制农杆菌生长的抗生素浓度以头孢霉素(Cef)250mgL-1和羧苄青霉素(Cb)250mgL-1且延迟筛选时间4d最好;共培养基中添加100μmol/L乙酰丁香酮(AS)和400mgL-1半胱氨酸(L-Cys)对佛手遗传转化有明显的促进作用。经GUS报告基因和PCR技术检测,初步证实TPS基因已整合到佛手基因组中,且GUS报告基因瞬时表达率为5.9%。

关 键 词:佛手  农杆菌  遗传转化  海藻糖合酶基因(TPS)
文章编号:1005-3395(2006)05-0374-08
收稿时间:2005-12-16
修稿时间:2006-04-17

Factors Effecting the Transformation of Citrus medica L.var. sarcodactlis Mediated by Agrobacterium
ZHOU Chun-li,GUO Wei-dong,LU Mei,CHEN Jin,LI Yu-ping.Factors Effecting the Transformation of Citrus medica L.var. sarcodactlis Mediated by Agrobacterium[J].Journal of Tropical and Subtropical Botany,2006,14(5):374-381.
Authors:ZHOU Chun-li  GUO Wei-dong  LU Mei  CHEN Jin  LI Yu-ping
Institution:1. College of Life Sciences, Jiangxi Normal University of Science and Technology, Nanchang 330013, China ; 2. Academy of Life and Environment Science, Zhejiang Normal University, Jinhua 321004, China; 3. College of Horticulture, Northwest A gric ultural and Foresty University, Yangling 712100, China
Abstract:
Keywords:Citrus medica L  var  sarcodactlis  Agrobacterium  Genetic transformation  Trehalose synthase gene  
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