| 大肠杆菌BL21(DE3)中定向进化突变体库构建的方法比较 |
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| 引用本文： | 陈菲云,张大伟,刘森.大肠杆菌BL21(DE3)中定向进化突变体库构建的方法比较[J].生物技术世界,2013(10):68-70. |
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| 作者姓名： | 陈菲云 张大伟 刘森 |
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| 作者单位： | 三峡大学医学院/分子生物学研究所;中国科学院天津工业生物技术研究所; |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(No.31200036,No.31370089,No.21103098,No.91330113);天津市科技支撑计划重点项目(12ZCZDSY12700,11ZCZDSY08500) |
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| 摘 要： | 定向进化的突变体库建立是定向进化是否成功的关键因素,只有建立足够大的库容才有可能筛选到合适的突变体。然而用来做定向进化的宿主菌的转化效率并不总是那么高,难以达到建库要求。而且在以常规分子克隆方法做连接转化时,耗时长,效率低等问题也影响了突变体库的建立,高效的克隆转化方法是定向进化所需求的。本文以大肠杆菌BL21(DE3)为转化宿主菌,挑选了一种新的高效的克隆转化方法,与现在实验室常规克隆转化方法进行了比较,证明了PCR多聚质粒的克隆转化方法在定向进化突变体库构建中的优势。为定向进化突变体库的构建提供了新的高效可靠的技术方法。
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| 关 键 词： | 酶 定向进化 克隆转化 突变库 多聚质粒 |
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