鸡传染性支气管炎病毒中国流行株免疫原S1基因的分子克隆、序列分析及其DNA免疫的初步研究*

对来源于我国华东地区的鸡传染性支气管炎病毒流行株QD免疫原Sl基因cDNA进行了克隆、序列分析和DNA免疫的初步研究。RT—PCR扩增QD毒株的S1基因，将其5’和3’端分别进行分子修饰后插入克隆载体pUCl8的BamHⅠ／HindⅢ位电，在大肠杆菌中实现了目的基因的克隆；利用英国IBV毒株Sl全基因核酸探针与QD毒株S1基因的重组克隆质粒分子杂交后，采用HaeⅢ，PvuⅡ和XbaⅠ等限制酶对此流行毒株S1基固cDNA进行了酶切分析；在测定QD毒株S1基因5’端高变区核苷酸序列并以此与IBV　M41，H120，6／82及Beaud等参考毒株序列对比分析的基础上，构建了QD株S1基因DNA免疫表达质粒，肌肉注射免疫小鼠后，鸡胚病毒中和试验的结果表明，IBV S1基因DNA免疫表达质粒能诱导小鼠产生病毒特异的中和抗体，具有良好的免疫原性，初步显示基因疫苗在鸡传染性支气管炎防治上应用前景。