| HPV-16L1植物表达载体的构建及HPV-16L1在转基因烟草中表达的鉴定 |
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| 引用本文： | 刘红莉, 陈宏伟, 李文生, 雷霆, 王喆之, 王一理, 司履生,.HPV-16L1植物表达载体的构建及HPV-16L1在转基因烟草中表达的鉴定[J].生物工程学报,2004,20(6):827-831. |
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| 作者姓名： | 刘红莉 陈宏伟 李文生 雷霆 王喆之 王一理 司履生 |
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| 作者单位： | 1. 西安交通大学生命科学与技术学院癌症研究所,环境与疾病相关基因教育部重点实验室,西安,710061
2. 陕西师范大学生命科学院,西安,710062 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助 (No .3 0 0 70 848)~~ |
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| 摘 要： | 利用PCR技术克隆人乳头瘤病毒HPV-16L1蛋白编码基因 ,将其重组于pUCmT和pBI12 1中 ,构建含HPV 16L1基因的植物双元表达载体pBI L1,L1基因由CaMV 35S启动子控制表达。采用叶盘共培育法经根瘤农杆菌介导转化烟草 (NicotianatobacumL .) ,获得HPV-16L1转基因烟草植株。经PCR及Southern杂交分析 ,HPV 16L1基因整合到烟草基因组中 ;Westernblot和ELISA分析检测显示转基因烟草叶片蛋白可与HPV 16L1单克隆抗体特异性反应 ,且定位于 5 5kD处 ,其最高表达量占烟草叶片总可溶蛋白的0.076 %。小鼠红细胞凝集试验 (HA)及小鼠红细胞凝集抑制试验 (HAI)显示转基因烟草叶片蛋白可引起小鼠红细胞凝集。结果表明已成功地构建了HPV-16L1的植物双元表达载体 ,并证实了利用转基因烟草植物能够表达出HPV-16L1蛋白 ,所表达的L1蛋白具有良好的抗原性并具有介导小鼠红细胞凝集的生物活性.
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| 关 键 词： | 人乳头瘤病毒 病毒样颗粒 转基因烟草 植物疫苗 根瘤农杆菌 |
| 文章编号： | 1000-3061(2004)06-0827-05 |
| 修稿时间： | 2004年4月13日 |
Construction of HPV-16L1 Plant Expression Vector and Expression L1 Protein in Transgenic Tobacco Plants |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Human papillomavirus virus-like particles transgenic tobacco plant vaccine Agrobacterium tumefaciens L1 major capsid protein |
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