| 长江江豚TRAIL基因的克隆、体外表达及生物学功能分析 |
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| 引用本文： | 裴丽丽,章纬菁,卢佳,黄芳,曹倩倩,任文华.长江江豚TRAIL基因的克隆、体外表达及生物学功能分析[J].生物工程学报,2016,32(5):610-620. |
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| 作者姓名： | 裴丽丽 章纬菁 卢佳 黄芳 曹倩倩 任文华 |
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| 作者单位： | 1 南京师范大学 生命科学学院 江苏省分子医学重点实验室，江苏 南京 210046；2 南京医科大学 康达学院，江苏 连云港 222000,1 南京师范大学 生命科学学院 江苏省分子医学重点实验室，江苏 南京 210046,1 南京师范大学 生命科学学院 江苏省分子医学重点实验室，江苏 南京 210046,1 南京师范大学 生命科学学院 江苏省分子医学重点实验室，江苏 南京 210046,1 南京师范大学 生命科学学院 江苏省分子医学重点实验室，江苏 南京 210046,1 南京师范大学 生命科学学院 江苏省分子医学重点实验室，江苏 南京 210046 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金 (No. 31370401) 资助。 |
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| 摘 要： | 构建可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)基因的表达体系,研究其蛋白表达产物对肿瘤细胞凋亡的影响,为以后江豚免疫系统的研究奠定基础。通过RT-PCR技术从江豚Neophocaena phoconoides血液总RNA中反转录扩增出肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(简称fTRAIL)的全长cDNA序列,并将fTRAIL的胞外可溶性(简称fsTRAIL)片段连接入表达载体pET43.1a中,在大肠杆菌BL21(DE3)中表达并纯化,Western blotting对产物Nus-His-fsTRAIL蛋白进行鉴定。体外用MTT法、台盼蓝拒染法及流式细胞术检测Nus-His-fs TRAIL蛋白对Jurkat细胞和HeLa细胞的影响。成功构建了fTRAIL胞外可溶性片段(简称fsTRAIL)与pET43.1a组成的表达载体,并获得Nus-His-fsTRAIL蛋白。体外实验表明,Nus-His-fsTRAIL蛋白能够以剂量依赖的方式抑制Jurkat和HeLa细胞的增殖并诱导其凋亡。Nus-His-fsTRAIL表达产物具有对Jurkat和HeLa细胞体外抗肿瘤活性的作用。
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| 关 键 词： | TRAIL，江豚，细胞凋亡，Jurkat细胞，HeLa细胞 |
| 收稿时间： | 2015/10/10 0:00:00 |
Molecular cloning, in vitro expression and bioactivity of TRAIL (TNFSF10) gene from finless porpoises |
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| Lili Pei,Weijing Zhang,Jia Lu,Fang Huang,Qianqian Cao and Wenhua Ren.Molecular cloning, in vitro expression and bioactivity of TRAIL (TNFSF10) gene from finless porpoises[J].Chinese Journal of Biotechnology,2016,32(5):610-620. |
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| Authors: | Lili Pei Weijing Zhang Jia Lu Fang Huang Qianqian Cao and Wenhua Ren |
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| Institution: | 1 Jiangsu Province Key Laboratory for Molecular and Medical Biotechnology, College of Life Sciences, Nanjing Normal University, Nanjing 210046, Jiangsu, China; 2 Kangda College of Nanjing Medical University, Lianyungang 222000, Jiangsu, China,1 Jiangsu Province Key Laboratory for Molecular and Medical Biotechnology, College of Life Sciences, Nanjing Normal University, Nanjing 210046, Jiangsu, China,1 Jiangsu Province Key Laboratory for Molecular and Medical Biotechnology, College of Life Sciences, Nanjing Normal University, Nanjing 210046, Jiangsu, China,1 Jiangsu Province Key Laboratory for Molecular and Medical Biotechnology, College of Life Sciences, Nanjing Normal University, Nanjing 210046, Jiangsu, China,1 Jiangsu Province Key Laboratory for Molecular and Medical Biotechnology, College of Life Sciences, Nanjing Normal University, Nanjing 210046, Jiangsu, China and 1 Jiangsu Province Key Laboratory for Molecular and Medical Biotechnology, College of Life Sciences, Nanjing Normal University, Nanjing 210046, Jiangsu, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | TRAIL finless porpoises (Neophocaena phoconoides) apoptosis Jurkat cells HeLa cells |
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