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美洲拟鲽抗菌肽Pleurocidin在大肠杆菌中的高效分泌表达及优化
引用本文:徐雪姣,查向东,车媛媛,马利娟,吴思群,杨培龙,黄火清,姚斌.美洲拟鲽抗菌肽Pleurocidin在大肠杆菌中的高效分泌表达及优化[J].生物工程学报,2016,32(3):365-374.
作者姓名:徐雪姣  查向东  车媛媛  马利娟  吴思群  杨培龙  黄火清  姚斌
作者单位:1 安徽大学 生命科学学院,安徽 合肥 230601,1 安徽大学 生命科学学院,安徽 合肥 230601,1 安徽大学 生命科学学院,安徽 合肥 230601,1 安徽大学 生命科学学院,安徽 合肥 230601,1 安徽大学 生命科学学院,安徽 合肥 230601,2 中国农业科学院 饲料研究所,北京 100081,2 中国农业科学院 饲料研究所,北京 100081,2 中国农业科学院 饲料研究所,北京 100081
基金项目:安徽省自然科学基金 (No. 1408085MC50) 资助。
摘    要:为在大肠杆菌中分泌表达Pleurocidin,并提高融合蛋白的分泌效率,将Pleurocidin基因和Cherry DNA序列通过平末端连接融合,再将融合基因整合到p ET22b(+)载体中,转化大肠杆菌BL21(DE3);乳糖诱导表达。成功构建含p ET22b(+)-CP重组质粒的基因工程菌,用乳糖诱导获得高效表达。在诱导16 h时加入甘氨酸可以显著提高融合蛋白Cherry-Pleurocidin的分泌效率。用稀盐酸水解融合蛋白的酸敏感位点,再进一步分离纯化即得到r-Pleurocidin,其对大肠杆菌DH5α和枯草芽孢杆菌BS168具有明显的抑菌活性。结果表明成功构建了高效表达Pleurocidin的大肠杆菌基因工程菌,获得有活性的r-Pleurocidin。

关 键 词:Pleurocidin,分泌表达,Asp-Pro酸敏感位点,抑菌活性
收稿时间:2015/6/19 0:00:00

Expression of Pleurocidin from winter flounder in Escherichia coli and optimization of culture conditions
Xuejiao Xu,Xiangdong Zh,Yuanyuan Che,Lijuan M,Siqun Wu,Peilong Yang,Huoqing Huang and Bin Yao.Expression of Pleurocidin from winter flounder in Escherichia coli and optimization of culture conditions[J].Chinese Journal of Biotechnology,2016,32(3):365-374.
Authors:Xuejiao Xu  Xiangdong Zh  Yuanyuan Che  Lijuan M  Siqun Wu  Peilong Yang  Huoqing Huang and Bin Yao
Institution:1 School of Life Sciences, Anhui University, Hefei 230601, Anhui, China,1 School of Life Sciences, Anhui University, Hefei 230601, Anhui, China,1 School of Life Sciences, Anhui University, Hefei 230601, Anhui, China,1 School of Life Sciences, Anhui University, Hefei 230601, Anhui, China,1 School of Life Sciences, Anhui University, Hefei 230601, Anhui, China,2 Feed Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100081, China,2 Feed Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100081, China and 2 Feed Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100081, China
Abstract:
Keywords:Pleurocidin  secretory expression  Asp-Pro acid-sensitive sites  antibacterial activity
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