猪流行性腹泻病毒nsp1蛋白对Ⅰ型干扰素应答的影响 |
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引用本文: | 王晓雪,李红杰,李永涛,高冬生,陈陆,常洪涛,刘红英,王川庆,赵军.猪流行性腹泻病毒nsp1蛋白对Ⅰ型干扰素应答的影响[J].生物工程学报,2017,33(8):1325-1334. |
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作者姓名: | 王晓雪 李红杰 李永涛 高冬生 陈陆 常洪涛 刘红英 王川庆 赵军 |
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作者单位: | 河南农业大学 牧医工程学院,河南 郑州 450002,河南农业大学 牧医工程学院,河南 郑州 450002,河南农业大学 牧医工程学院,河南 郑州 450002,河南农业大学 牧医工程学院,河南 郑州 450002,河南农业大学 牧医工程学院,河南 郑州 450002,河南农业大学 牧医工程学院,河南 郑州 450002,河南农业大学 牧医工程学院,河南 郑州 450002,河南农业大学 牧医工程学院,河南 郑州 450002,河南农业大学 牧医工程学院,河南 郑州 450002 |
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基金项目: | 河南省高校科技创新团队支持计划 (No. 14IRTSTHN015),河南省高等学校重点科研项目 (No. 16A230002),郑州市国际合作交流项目 (No. 153PGJHZ203) 资助。 |
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摘 要: | 猪流行性腹泻病毒 (PEDV) 能抑制宿主Ⅰ型干扰素及其诱导的细胞抗病毒免疫应答,但是PEDV抑制Ⅰ型干扰素应答的分子机制尚不明了,尤其是PEDV非结构蛋白 (Nonstructural proteins,nsps) 在Ⅰ型干扰素应答中的调控作用研究不多。为研究PEDV非结构蛋白1 (nsp1) 对细胞Ⅰ型干扰素应答的影响,构建了真核表达载体pCAGGS-nsp1,采用Western blotting和间接免疫荧光试验确定nsp1在细胞中的表达。通过报告基因法、ELISA以及病毒复制抑制试验评估nsp1对Ⅰ型IFN的影响。结果显示,nsp1在转染细胞和病毒感染细胞中均高效表达;双荧光报告基因试验结果表明,nsp1能显著抑制IFN-β启动子活性,且具有剂量依赖性。ELISA结果显示,nsp1能显著抑制IFN-β蛋白的表达。水泡性口炎病毒 (VSV) 复制抑制试验结果显示,nsp1明显抑制poly(I:C)介导的Ⅰ型IFN的抗病毒作用。结果提示,nsp1作为PEDV的保守蛋白,具有拮抗Ⅰ型干扰素启动子活性和应答的功能,为揭示PEDV逃逸宿主天然免疫应答的机制和研发新型高效抗PEDV疫苗奠定基础。
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关 键 词: | 猪流行性腹泻病毒,非结构蛋白1,Ⅰ型干扰素 |
收稿时间: | 2017/2/24 0:00:00 |
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