| 重组人源SNX7蛋白在大肠杆菌中的表达、纯化及磷脂结合特异性分析 |
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| 引用本文： | 冯站,许婷婷,徐进新.重组人源SNX7蛋白在大肠杆菌中的表达、纯化及磷脂结合特异性分析[J].生物工程学报,2014,30(9):1436-1445. |
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| 作者姓名： | 冯站 许婷婷 徐进新 |
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| 作者单位： | 1 安徽大学生命科学学院，安徽 合肥 230601；2 中国科学院广州生物医药与健康研究院，广东 广州 510530;2 中国科学院广州生物医药与健康研究院，广东 广州 510530;2 中国科学院广州生物医药与健康研究院，广东 广州 510530 |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展计划 (973计划) (No. 2012CB917200) 资助。 |
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| 摘 要： | Sorting nexins(SNXs)是一类含有SNX-PX结构域,并在细胞内吞和内体分选运输过程中发挥重要调节作用的蛋白。SNX7是SNXs家族中的一员,含有PX结构域和BAR结构域,属于SNX-PX-BAR亚家族。斑马鱼实验表明,SNX7是在肝脏中大量表达的抗凋亡蛋白,并在胚胎肝脏的发育中发挥关键作用。为了从蛋白水平对SNX7进行研究,首先将编码人源PX-BARSNX7(SNX7的一个片段,包含PX和BAR结构域)的cDNA片段插入到原核表达载体p28a中,再将重组质粒转化到大肠杆菌Rosseta 2(DE3)中诱导表达,并用亲和层析、离子交换和分子筛层析对PX-BARSNX7进行了纯化。Western blotting结果表明,亲和层析、离子交换和分子筛层析纯化后获得了高纯度的PX-BARSNX7蛋白。动态光散射实验显示PX-BARSNX7蛋白均一性良好。磷脂结合实验表明,PX-BARSNX7具有较为广泛的磷脂酰肌醇结合能力,能够与PtdIns(5)P、PtdIns(4,5)P2和PtdIns(3,4,5)P3结合。
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| 关 键 词： | Sorting nexin (SNX) 磷脂结合 均一性 表达纯化 |
| 收稿时间： | 2013/11/25 0:00:00 |
Expression, purification and phosphoinositide binding specifity of recombinant human SNX7 expressed in Escherichia coli |
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| Zhan Feng,Tingting Xu and Jinxin Xu.Expression, purification and phosphoinositide binding specifity of recombinant human SNX7 expressed in Escherichia coli[J].Chinese Journal of Biotechnology,2014,30(9):1436-1445. |
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| Authors: | Zhan Feng Tingting Xu and Jinxin Xu |
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| Institution: | 1 School of Life Science, Anhui University, Hefei 230601, Anhui, China; 2 Guangzhou Institutes of Biomedicine and Health, Chinese Academy of Sciences (GIBH), Guangzhou 510530, Guangdong, China;2 Guangzhou Institutes of Biomedicine and Health, Chinese Academy of Sciences (GIBH), Guangzhou 510530, Guangdong, China;2 Guangzhou Institutes of Biomedicine and Health, Chinese Academy of Sciences (GIBH), Guangzhou 510530, Guangdong, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Sorting nexin 7 (SNX7) lipid overlay assay homogeneity expression and purification |
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