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猪繁殖与呼吸综合征病毒嵌合感染性克隆的构建和应用
引用本文:李祥健,张建武,吕健,余丹丹,姚火春,袁世山.猪繁殖与呼吸综合征病毒嵌合感染性克隆的构建和应用[J].生物工程学报,2008,24(9):1573-1581.
作者姓名:李祥健  张建武  吕健  余丹丹  姚火春  袁世山
作者单位:1. 中国农业科学院上海兽医研究所动物传染病防治研究室,农业部动物寄生虫病重点实验室,上海,200241;南京农业大学动物医学院农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,南京,210095
2. 中国农业科学院上海兽医研究所动物传染病防治研究室,农业部动物寄生虫病重点实验室,上海,200241
3. 南京农业大学动物医学院农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,南京,210095
基金项目:国家科技支撑计划,上海市科技兴农计划,上海市浦江人才计划,国家重点基础研究发展计划(973计划)
摘    要:高致病性猪蓝耳病近年来在我国广泛流行,目前尚无高效疫苗用于该病的防制.本研究以PRRSV弱毒感染性克隆-pAPRRS作为主要骨架,将高致病性猪蓝耳病病毒江西分离株(JX143)的主要结构蛋白基因(ORF4-7)以及3'UTR区域替换入pAPPRS相应编码区域,构建了pSX12(ORF4-7-3'UTR)、p5NX12(ORF5-7-3'UTR)以及p56N12(ORF5-6)三个PRRSV全长嵌合克隆.经DNA转染Marc-145细胞后拯救出嵌合病毒,并对拯救病毒进行了病毒生物学特性的分析;选取拯救病毒v56N12(ORF5-6)和vSX12(ORF4-7-3'UTR)免疫29日龄猪进行免疫原性试验,结果表明,以v56N12免疫后抗体水平相对较低,故免疫原性相对较差;而vSX12病毒免疫后14d血清ELISA抗体达到阳性值(IDEXXELISA值s/p>0.4),免疫后28d中和抗体效价从原来的1:5以下上升到1:15以上,说明vSX12具有良好的免疫原性并可进行免疫监测;免疫后28 d以强毒JX143株攻毒,结果vSX12免疫组未见发病,而未免疫攻毒对照组全部发病并有1头死亡,vSX12免疫猪攻毒后病毒血症持续6d后消失.而对照组攻毒后至少持续13 d,说明vSX12可对高致病性猪蓝耳病提供有效的免疫保护.本研究构建的三个嵌合病毒为开发同时抗经典和变异株PRRSV感染的二价疫苗,以及探寻高致病性猪蓝耳病病毒的毒力因子奠定了基础.

关 键 词:猪繁殖与呼吸障碍综合征  高致病性猪蓝耳病  感染性克隆  嵌合病毒  候选疫苗
收稿时间:2008/1/18 0:00:00

Construction and Application of Chimeric Infectious Clones of Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus
Xiangjian Li,Jianwu Zhang,Jian Lu,Dandan Yu,Huochun Yao,Shishan Yuan.Construction and Application of Chimeric Infectious Clones of Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus[J].Chinese Journal of Biotechnology,2008,24(9):1573-1581.
Authors:Xiangjian Li  Jianwu Zhang  Jian Lu  Dandan Yu  Huochun Yao  Shishan Yuan
Institution:Department of Animal Infectious Diseases, Shanghai Veterinary Research Institute, China Academy of Agricultural Sciences, Shanghai 200241, China; Key Laboratory of Animal Diseases Diagnostic and Immunology, College of Veterinary Medicine, Nanjing Agricult;Department of Animal Infectious Diseases, Shanghai Veterinary Research Institute, China Academy of Agricultural Sciences, Shanghai 200241, China;Department of Animal Infectious Diseases, Shanghai Veterinary Research Institute, China Academy of Agricultural Sciences, Shanghai 200241, China;Department of Animal Infectious Diseases, Shanghai Veterinary Research Institute, China Academy of Agricultural Sciences, Shanghai 200241, China;Key Laboratory of Animal Diseases Diagnostic and Immunology, College of Veterinary Medicine, Nanjing Agricultural University, Ministry of Agriculture, Nanjing 210095, China;Department of Animal Infectious Diseases, Shanghai Veterinary Research Institute, China Academy of Agricultural Sciences, Shanghai 200241, China
Abstract:
Keywords:PRRSV  high pathogenecity  infectious cDNA clone  chimeric viruses  vaccine candidates
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