| 重组人骨形态发生蛋白-6的表达、纯化及其活性分析 |
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| 引用本文： | 阳菊华,赵丽,杨爽,吴双庆,张杰,朱天慧.重组人骨形态发生蛋白-6的表达、纯化及其活性分析[J].生物工程学报,2003,19(5):556-560. |
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| 作者姓名： | 阳菊华 赵丽 杨爽 吴双庆 张杰 朱天慧 |
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| 作者单位： | 南开大学医学院医学分子遗传实验室,天津,300071 |
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| 基金项目： | 天津市自然科学基金资助 (No.0 13 60 8911)~~ |
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| 摘 要： | 利用RT-PCR从人胎盘组织中获取BMP-6成熟肽的cDNA 片段，并克隆到表达载体pET-15b中， 构建hBMP_6成熟肽的非融合蛋白表达质粒pET-BMP6，转化E.coli BL21（DE3）。IPTG 诱导4h后，工程菌高表达rhBMP-6成熟肽，在SDS-PAGE上出现预期的新蛋白带(≈15kD)， 约占菌体总蛋白的10%，表达产物以包涵体形式存在。分离和纯化的包涵体溶解于8 mol/L尿素，在变性溶解状态下经阳离子交换层析,得到目的蛋白纯度达95%以上。再经稀释复性后，约80%的rhBMP-6形成同源二聚体。体外活性分析结果显示：rhBMP-6可以提高C3H10T1/2 细胞碱性磷酸酶活性及促进I型胶原、Osterix（Osx）和骨钙素（Osteocalcin）等成骨细胞表型转化标记基因mRNA的表达，证明制备的rhBMP_6具有诱导非骨源性细胞分化成为成骨细胞的作用。
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| 关 键 词： | 人骨形态发生蛋白-6，大肠杆菌，C3H10T1/2细胞，成骨细胞表型转化标记基因 |
| 文章编号： | 1000-3061(2003)05-0556-05 |
| 修稿时间： | 2003年3月29日 |
Expression of Recombinant Human BMP-6 in Escherichia coli and Its Purification and Bioassay in vitro |
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| YANG Ju Hua ZHAO Li YANG Shuang WU Shuang Qing ZHANG Jie,ZHU Tian Hui.Expression of Recombinant Human BMP-6 in Escherichia coli and Its Purification and Bioassay in vitro[J].Chinese Journal of Biotechnology,2003,19(5):556-560. |
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| Authors: | YANG Ju Hua ZHAO Li YANG Shuang WU Shuang Qing ZHANG Jie ZHU Tian Hui |
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| Institution: | Medical Molecular Genetics Lab, Medical College of Nankai University, Tianjin 300071, China. |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | human bone morphogenetic protein_6 Escherichia coli C3H10T1/2 cell line osteoblast marker genes |
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