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IBDV丝素蛋白/壳聚糖DNA微球疫苗的制备及免疫原性分析
引用本文:刘岩,吕志强,张存,祝新荣,石团员,钟石,孟智启.IBDV丝素蛋白/壳聚糖DNA微球疫苗的制备及免疫原性分析[J].生物工程学报,2014,30(3):393-403.
作者姓名:刘岩  吕志强  张存  祝新荣  石团员  钟石  孟智启
作者单位:浙江省农业科学院蚕桑研究所 浙江省植物有害生物防控重点实验室——省部共建国家重点实验室培育基地,浙江 杭州 310021;浙江省农业科学院蚕桑研究所 浙江省植物有害生物防控重点实验室——省部共建国家重点实验室培育基地,浙江 杭州 310021;浙江省农业科学院畜牧兽医研究所,浙江 杭州 310021;浙江省农业科学院蚕桑研究所 浙江省植物有害生物防控重点实验室——省部共建国家重点实验室培育基地,浙江 杭州 310021;浙江省农业科学院畜牧兽医研究所,浙江 杭州 310021;浙江省农业科学院蚕桑研究所 浙江省植物有害生物防控重点实验室——省部共建国家重点实验室培育基地,浙江 杭州 310021;浙江省农业科学院蚕桑研究所 浙江省植物有害生物防控重点实验室——省部共建国家重点实验室培育基地,浙江 杭州 310021
基金项目:浙江省自然科学基金 (No. Y3110544),浙江省农业科学院重点实验室开放课题资助。
摘    要:为了制备传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)DNA微球疫苗,并评价其免疫效果。以丝素蛋白(Silk fibroin,SF)/壳聚糖(Chitosan,CS)为壁材,IBDV的VP2/4/3 DNA疫苗为芯材,通过戊二醛和Na2SO4介导的乳化交联技术,制备出SF/CS复合微球疫苗,然后经肌肉注射14日龄非免疫鸡,2周后加强免疫一次,酶联免疫法(ELISA)定期监测鸡血清的IBDV抗体,以研究微球化疫苗的免疫原性。结果显示:戊二醛介导交联方法影响荷载DNA疫苗的活性,而Na2SO4介导的交联方法操作简单且不影响荷载DNA活性;建立了以壳聚糖浓度0.5%(pH 5.0)、丝素蛋白浓度0.6%,质粒DNA 500μg/mL溶解在2%Na2SO4溶液中的工作条件;SF-CS复合微球DNA疫苗荷载率89.14%,大小1.98μm,对DNaseⅠ的消化有保护作用。免疫后的抗IBDV血清ELISA抗体的检测显示,微球免疫组总体高于质粒疫苗免疫组(P0.05),而且SF/CS复合微球组免疫反应要略高于单纯CS包被的抗原组。研究表明,丝素蛋白/壳聚糖作为微球佐剂能提高IBDV DNA疫苗的临床免疫效果,有很好的应用前景。

关 键 词:微球疫苗  丝素  壳聚糖  IBDV  VP//  免疫原性
收稿时间:2013/7/11 0:00:00

Preparation and immunogenicity of silk fibroin/ chitosan microspheres for DNA vaccine delivery against infectious bursal disease virus
Yan Liu,Zhiqiang Lv,Cun Zhang,Xingrong Zhu,Tuanyuan Shi,Shi Zhong and Zhiqi Meng.Preparation and immunogenicity of silk fibroin/ chitosan microspheres for DNA vaccine delivery against infectious bursal disease virus[J].Chinese Journal of Biotechnology,2014,30(3):393-403.
Authors:Yan Liu  Zhiqiang Lv  Cun Zhang  Xingrong Zhu  Tuanyuan Shi  Shi Zhong and Zhiqi Meng
Institution:State Key Laboratory Breeding Base for Zhejiang Sustainable Plant Pest and Disease Control, the Sericultural Research Institute, Zhejiang Academy of Agricultural Science, Hangzhou 310021, Zhejiang, China;State Key Laboratory Breeding Base for Zhejiang Sustainable Plant Pest and Disease Control, the Sericultural Research Institute, Zhejiang Academy of Agricultural Science, Hangzhou 310021, Zhejiang, China;Institute of Animal Husbandry and Veterinary Medicine, Zhejiang Academy of Agricultural Sciences, Hangzhou 310021, Zhejiang, China;State Key Laboratory Breeding Base for Zhejiang Sustainable Plant Pest and Disease Control, the Sericultural Research Institute, Zhejiang Academy of Agricultural Science, Hangzhou 310021, Zhejiang, China;Institute of Animal Husbandry and Veterinary Medicine, Zhejiang Academy of Agricultural Sciences, Hangzhou 310021, Zhejiang, China;State Key Laboratory Breeding Base for Zhejiang Sustainable Plant Pest and Disease Control, the Sericultural Research Institute, Zhejiang Academy of Agricultural Science, Hangzhou 310021, Zhejiang, China;State Key Laboratory Breeding Base for Zhejiang Sustainable Plant Pest and Disease Control, the Sericultural Research Institute, Zhejiang Academy of Agricultural Science, Hangzhou 310021, Zhejiang, China
Abstract:
Keywords:microsphere vaccine  silk fibroin  chitosan  IBDV  VP2/4/3  immunogenicity
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