| 基于时间序列转录组筛选谷氨酸棒杆菌内源高效组成型启动子 |
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| 引用本文： | 王迎春,刘娇,倪晓蒙,雷宇,郑平,刁爱坡.基于时间序列转录组筛选谷氨酸棒杆菌内源高效组成型启动子[J].生物工程学报,2018,34(11):1760-1771. |
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| 作者姓名： | 王迎春 刘娇 倪晓蒙 雷宇 郑平 刁爱坡 |
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| 作者单位： | 1 天津科技大学 生物工程学院，天津 300457；2 中国科学院系统微生物工程重点实验室，天津 300308；3 中国科学院天津工业生物技术研究所，天津 300308,2 中国科学院系统微生物工程重点实验室，天津 300308；3 中国科学院天津工业生物技术研究所，天津 300308,2 中国科学院系统微生物工程重点实验室，天津 300308；3 中国科学院天津工业生物技术研究所，天津 300308,3 中国科学院天津工业生物技术研究所，天津 300308,2 中国科学院系统微生物工程重点实验室，天津 300308；3 中国科学院天津工业生物技术研究所，天津 300308,1 天津科技大学 生物工程学院，天津 300457 |
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| 基金项目： | 天津市科技计划项目 (Nos. 15PTCYSY00020，14ZCZDSY00058)，天津市特支计划高层次创新创业团队，国家自然科学基金 (No. 31700044) 资助。 |
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| 摘 要： | 启动子是重要的转录调控元件,广泛用于工业菌株的代谢工程改造。谷氨酸棒杆菌Corynebacterium glutamicum是重要的氨基酸生产菌株,但已报道的组成型强启动子较少。对谷氨酸高产菌Corynebacterium glutamicum SL4发酵过程的10个时间点样品进行转录组测序,筛选在发酵过程中稳定转录并且转录水平最高的10个基因;分别克隆其启动子序列至红色荧光蛋白(RFP)报告系统,通过荧光强度表征启动子在SL4菌株中的强度,再在野生型C. glutamicum ATCC 13869和ATCC 13032中验证部分启动子的通用性;并采用LacZ蛋白进一步评价强启动子的表达效果。结果显示,成功筛选到3个可以通用的组成型启动子P_(cysK)、P_(gapA)和P_(fumC)。其中P_(cysK)的表达强度最高,与诱导型强启动子P_(tac)对比,在SL4和13869菌株中均达到其2倍(RFP)和4倍(LacZ)以上;在ATCC 13032菌株中,P_(cysK)的表达强度为P_(tac)的0.3-0.4倍。Pcys K首次被报道为强启动子,可用于谷氨酸棒杆菌强化合成途径的代谢工程改造。
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| 关 键 词： | 谷氨酸棒杆菌，时间序列转录组，启动子，RFP报告系统 |
| 收稿时间： | 2018/1/29 0:00:00 |
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