| H9N2亚型流感病毒核酸参考品研制及荧光RT-PCR检测验证 |
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| 引用本文： | 宋洁,李翠,李晶,张爽,范文辉,刘丽蓉,贾泓毅,俞蔼毕,郝客,牛春艳,王晶,赵启祖,刘文军.H9N2亚型流感病毒核酸参考品研制及荧光RT-PCR检测验证[J].生物工程学报,2018,34(10):1579-1586. |
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| 作者姓名： | 宋洁 李翠 李晶 张爽 范文辉 刘丽蓉 贾泓毅 俞蔼毕 郝客 牛春艳 王晶 赵启祖 刘文军 |
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| 作者单位： | 1 中国科学院微生物研究所 中国科学院病原微生物与免疫学重点实验室，北京 100101；2 中国科学院大学，北京 100049,3 中国兽医药品监察所，北京 100081,1 中国科学院微生物研究所 中国科学院病原微生物与免疫学重点实验室，北京 100101；2 中国科学院大学，北京 100049,1 中国科学院微生物研究所 中国科学院病原微生物与免疫学重点实验室，北京 100101,1 中国科学院微生物研究所 中国科学院病原微生物与免疫学重点实验室，北京 100101,1 中国科学院微生物研究所 中国科学院病原微生物与免疫学重点实验室，北京 100101,4 北京海淀外国语实验学校，北京 100195,4 北京海淀外国语实验学校，北京 100195,4 北京海淀外国语实验学校，北京 100195,5 中国计量科学研究院，北京 100013,5 中国计量科学研究院，北京 100013,3 中国兽医药品监察所，北京 100081,1 中国科学院微生物研究所 中国科学院病原微生物与免疫学重点实验室，北京 100101；2 中国科学院大学，北京 100049 |
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| 基金项目： | 国家重点研发计划 (No. 2018YFC1200502) 资助。 |
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| 摘 要： | 从H9N2亚型流感病毒A/chicken/Hunan/04.14 (H9N2)核酸中扩增了HA基因的编码序列,克隆测序后,采用体外转录方法制备RNA。用RNA保存液稀释至含量约10~9 copies/μL。分装后进行均匀性和稳定性检验,通过4家实验室协作标定,取平均值作为定值结果。此外,文中建立的实时荧光定量PCR (qPCR)快速检测技术,对临床样品进行准确检测验证,检测限可达10个拷贝。结果表明,文中制备的核酸参考品可作为H9N2亚型流感病毒核酸快速检测方法的阳性定量参考品。
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| 关 键 词： | H9N2亚型流感病毒，HA基因，参考品，荧光RT-PCR |
| 收稿时间： | 2018/1/21 0:00:00 |
Development and verification of reference nucleic acid materials of H9N2 influenza viruses by real-time RT-PCR |
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| Jie Song,Cui Li,Jing Li,Shuang Zhang,Wenhui Fan,Lirong Liu,Hongyi Ji,Aibi Yu,Ke Hao,Chunyan Niu,Jing Wang,Qizu Zhao and Wenjun Liu.Development and verification of reference nucleic acid materials of H9N2 influenza viruses by real-time RT-PCR[J].Chinese Journal of Biotechnology,2018,34(10):1579-1586. |
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| Authors: | Jie Song Cui Li Jing Li Shuang Zhang Wenhui Fan Lirong Liu Hongyi Ji Aibi Yu Ke Hao Chunyan Niu Jing Wang Qizu Zhao and Wenjun Liu |
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| Institution: | 1 Key Laboratory of Pathogenic Microbiology and Immunology, Institute of Microbiology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China; 2 University of Chinese Academy of Sciences, Beijing 100049, China,3 China Institute of Veterinary Drug Control, Beijing 100081, China,1 Key Laboratory of Pathogenic Microbiology and Immunology, Institute of Microbiology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China; 2 University of Chinese Academy of Sciences, Beijing 100049, China,1 Key Laboratory of Pathogenic Microbiology and Immunology, Institute of Microbiology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China,1 Key Laboratory of Pathogenic Microbiology and Immunology, Institute of Microbiology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China,1 Key Laboratory of Pathogenic Microbiology and Immunology, Institute of Microbiology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China,4 Beijing Haidian Foreign Language Experiment School, Beijing 100195, China,4 Beijing Haidian Foreign Language Experiment School, Beijing 100195, China,4 Beijing Haidian Foreign Language Experiment School, Beijing 100195, China,5 National Institute of Metrology, Beijing 100013, China,5 National Institute of Metrology, Beijing 100013, China,3 China Institute of Veterinary Drug Control, Beijing 100081, China and 1 Key Laboratory of Pathogenic Microbiology and Immunology, Institute of Microbiology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China; 2 University of Chinese Academy of Sciences, Beijing 100049, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | H9N2 subtype influenza virus HA gene reference materials real-time RT-PCR |
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