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云锦杜鹃苯丙氨酸解氨酶基因的克隆及功能分析
引用本文:吕思佳,吴月燕,贾永红,何凡,蒋宝鑫,杨国霞,谢晓鸿.云锦杜鹃苯丙氨酸解氨酶基因的克隆及功能分析[J].生物工程学报,2022,38(1):374-385.
作者姓名:吕思佳  吴月燕  贾永红  何凡  蒋宝鑫  杨国霞  谢晓鸿
作者单位:浙江万里学院 生物与环境学院,浙江 宁波 315100
基金项目:浙江省重点研发计划项目(2021C02053); 浙江省“生物工程”一流学科学生创新计划项目(CX2020017)
摘    要:苯丙氨酸解氨酶(phenylalaninammo-nialyase,PAL)是植物香气化合物中苯甲酸甲酯合成途径的关键酶。为探究云锦杜鹃Rhododendron fortunei RhPAL基因的功能,利用RT-PCR和cDNA末端快速扩增技术(rapid amplification of cDNA ends,RACE)技术克隆RhPAL基因全长cDNA序列,并应用高效液相色谱-质谱(liquid chromatography-mass spectrometry,LC-MS)联用技术分析云锦杜鹃不同发育阶段的不同组织中RhPAL基因表达水平和代谢物含量变化关系。结果表明,从云锦杜鹃花cDNA中克隆得到RhPAL基因,含有完整的cDNA开放阅读框(open reading frame,ORF)序列长2145bp,编码715个氨基酸,与其他物种的PAL蛋白质氨基酸序列具有较高的同源性;qRT-PCR分析表明,在不同花期的花瓣中,RhPAL表达量呈上升趋势,在衰败期表达量最高,雌蕊的表达量远远高于雄蕊,同时,新叶高于老叶,叶片的表达量高于花瓣和花蕊。通过酶联检疫法检测分析云锦杜鹃不同花期的花...

关 键 词:杜鹃  高效液相色谱-质谱联用  苯丙氨酸解氨酶  基因克隆  生物信息学分析  肉桂酸
收稿时间:2021/1/7 0:00:00

Cloning and functional analysis of the phenylalaninammo-nialyase gene from Rhododendron fortunei
Lü Sijia,WU Yueyan,JIA Yonghong,HE Fan,JIANG Baoxin,YANG Guoxia,XIE Xiaohong.Cloning and functional analysis of the phenylalaninammo-nialyase gene from Rhododendron fortunei[J].Chinese Journal of Biotechnology,2022,38(1):374-385.
Authors:LÜ Sijia  WU Yueyan  JIA Yonghong  HE Fan  JIANG Baoxin  YANG Guoxia  XIE Xiaohong
Institution:College of Biological and Environmental Sciences, Zhejiang Wanli University, Ningbo 315100, Zhejiang, China
Abstract:
Keywords:Rhododendron  LC-MS  PAL  gene clone  bioinformatics analysis  cinnamic acid
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