应用电激法在大肠杆菌中导入外源性DNA

本文报道用国产基因导科脉冲仪(LN－101型)，采用高压脉冲电场，将质粒DNA和噬菌体DNA成功地转化或转导人大肠杆菌。该电场单次电压脉冲范围1．Okv一2．5kv(初电场强度2，8kV／cm一16kV／cm)、电容范围5—20μF，用质粒pUC18和受体菌株DH5α，获得10　9－10　10转化子／μgDNA。电场强度、电容及脉冲时间等不同的因素影响转化效率。转化率与DNA的强度呈线性关系，与受体细胞密度成正比。 DNA和受体菌混合物在电激前，后的孵育时间，对转化效率影响不明显。用噬菌体M13mp 19 RF及受体菌株JMl09，同样可获得较高的转化效率。