农杆菌介导LJAMP2基因导入‘红阳’猕猴桃及分子鉴定 |
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引用本文: | 周月,赵许朋,吴秀华,张艳玲,张林,罗克明,汤绍虎.农杆菌介导LJAMP2基因导入‘红阳’猕猴桃及分子鉴定[J].生物工程学报,2014,30(6):931-942. |
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作者姓名: | 周月 赵许朋 吴秀华 张艳玲 张林 罗克明 汤绍虎 |
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作者单位: | 1 西南大学 三峡库区生态环境教育部重点实验室,重庆 400715;1 西南大学 三峡库区生态环境教育部重点实验室,重庆 400715;1 西南大学 三峡库区生态环境教育部重点实验室,重庆 400715;1 西南大学 三峡库区生态环境教育部重点实验室,重庆 400715;1 西南大学 三峡库区生态环境教育部重点实验室,重庆 400715;1 西南大学 三峡库区生态环境教育部重点实验室,重庆 400715|;2 西南大学 生命科学学院,重庆 400715;1 西南大学 三峡库区生态环境教育部重点实验室,重庆 400715|;2 西南大学 生命科学学院,重庆 400715 |
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基金项目: | 国家自然科学基金 (No. 30871576) 资助。 |
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摘 要: | 为了获得抗溃疡病的‘红阳’猕猴桃转基因植株,以红阳猕猴桃试管苗叶盘为转基因受体材料,通过根癌农杆菌介导将CaMV35S启动子调控下的LJAMP2基因导入红阳猕猴桃。450个叶盘与携带表达载体质粒pBI121的根癌农杆菌菌珠LBA4404共培养2 d后,转入含25 mg/L Kan的筛选培养基培养40 d,15 d转接1次,之后30 d继代1次。结果表明,在MS+3.0 mg/L BA+1.0 mg/L NAA筛选培养基中,Kanr芽率达85%以上,在1/2 MS+0.8 mg/L IBA培养基中,Kanr芽生根率达100%。共获得Kanr再生植株40株,经GUS组织染色和PCR分析证明,其中23株为转基因植株。阳性率为57.50%,转化率达5.11%。抗溃疡病基因LJAMP2已成功导入红阳猕猴桃,为红阳猕猴桃的抗病基因工程育种奠定了基础。
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关 键 词: | ‘红阳’猕猴桃 溃疡病 LJAMP基因 遗传转化 根癌农杆菌 |
收稿时间: | 2013/9/13 0:00:00 |
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