转修饰cry1Ac基因籼稻明恢81经花药培养获得抗虫DH系

对基因枪法获得的明恢81转修饰的cry1Ac基因当代植株进行花药培养，共接种花药2600枚，获得83份花培植株，其中双倍体植株43份，单倍体植株40份。 PCR结果表明含有cry1Ac基因的植株55份，花培植株群体中转基因与非转基因植株的比值为2∶1（55/28）。进一步结合Southern blot和ELISA分析，于花培植株当代筛选到转基因纯合株系36份。外源蛋白表达量上，花药来源于同一克隆的DH系的不同植株之间基本一致，最高的Cry1Ac含量达0.25%。田间抗虫性试验表明，经花药培养纯合获得的部分转基因纯合系植株对二化螟(Chilo suppressalis)表现出高抗，而且主要农艺性状保持不变。以上结果表明水稻花药培养可以加速转基因的纯合与育种利用。