| 杓兰果胶杆菌海藻糖酶的克隆表达及应用 |
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| 引用本文： | 高涵,龚劲松,汪子凯,苏畅,许正宏,史劲松.杓兰果胶杆菌海藻糖酶的克隆表达及应用[J].生物工程学报,2022,38(12):4658-4668. |
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| 作者姓名： | 高涵 龚劲松 汪子凯 苏畅 许正宏 史劲松 |
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| 作者单位： | 江南大学 生物工程学院 糖化学与生物技术教育部重点实验室, 江苏 无锡 214122;江南大学 生命科学与健康工程学院, 江苏 无锡 214122;江南大学 生物工程学院 粮食发酵与食品生物制造国家工程研究中心, 江苏 无锡 214122 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(21978116) |
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| 摘 要： | 海藻糖酶在工业发酵和食品医药等领域应用广泛，我国缺乏性能优良工业品种的海藻糖酶，同时在应用研究领域还不够深入。本研究从自然界筛选获得一株产酸性海藻糖酶的杓兰果胶杆菌(Pectobacterium cypripedii)，克隆获得其海藻糖酶基因PCTre，在大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)体系中实现了重组表达，在5L发酵罐上28h产酶达到4130U/mL。酶学性质研究显示，PCTre能特异性水解海藻糖，最适反应温度和pH分别是35℃和5.5，在pH4.0、4.5、5.0处理8h后残余酶活仍超过80%，表现出良好的耐酸性。同时该酶还显示出优良的有机溶剂耐受性，在20%(V/V)乙醇溶液中处理24h仍能保留60%的酶活。进一步在含有20%(V/V)乙醇和7.5%海藻糖的模拟发酵体系中，当添加500U/L PCTre，可在16h内完全水解海藻糖，具有良好的应用于工业乙醇发酵的潜力。
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| 关 键 词： | 海藻糖酶 海藻糖 杓兰果胶杆菌 乙醇耐受性 |
| 收稿时间： | 2022/3/4 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2022/7/26 0:00:00 |
Cloning, expression and properties of trehalase from Pectobacterium cypripedii |
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| GAO Han,GONG Jinsong,WANG Zikai,SU Chang,XU Zhenghong,SHI Jinsong.Cloning, expression and properties of trehalase from Pectobacterium cypripedii[J].Chinese Journal of Biotechnology,2022,38(12):4658-4668. |
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| Authors: | GAO Han GONG Jinsong WANG Zikai SU Chang XU Zhenghong SHI Jinsong |
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| Institution: | Key Laboratory of Carbohydrate Chemistry and Biotechnology, Ministry of Education, School of Biotechnology, Jiangnan University, Wuxi 214122, Jiangsu, China;School of Life Sciences and Health Engineering, Jiangnan University, Wuxi 214122, Jiangsu, China;National Engineering Research Center for Cereal Fermentation and Food Biomanufacturing, School of Biotechnology, Jiangnan University, Wuxi 214122, Jiangsu, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | trehalase trehalose Pectobacterium cypripedii ethanol tolerance |
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