| 登革病毒血清型特异单克隆抗体的制备和鉴定 |
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| 引用本文： | 刘杨,张元,魏艳秋,贾晓娟,陈启军,刘文军,杨利敏.登革病毒血清型特异单克隆抗体的制备和鉴定[J].生物工程学报,2020,36(10):2206-2215. |
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| 作者姓名： | 刘杨 张元 魏艳秋 贾晓娟 陈启军 刘文军 杨利敏 |
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| 作者单位： | 1 沈阳农业大学，辽宁 沈阳 110866;2 中国科学院微生物研究所 病原微生物与免疫学重点实验室，北京 100101;2 中国科学院微生物研究所 病原微生物与免疫学重点实验室，北京 100101;5 安徽大学，安徽 合肥 230601;4 中国科学院微生物研究所 生物安全三级实验室，北京 100101;2 中国科学院微生物研究所 病原微生物与免疫学重点实验室，北京 100101;3 中国科学院大学，北京 100049 |
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| 基金项目： | 国家重点研发计划 (Nos. 2018YFC1200602，2018YFC1200502)，国家科技重大专项 (Nos. 2016ZX10004222-006，2018ZX10734-404) 资助。 |
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| 摘 要： | 登革病毒 (Dengue virus，DENV) 是全球传播最为广泛的虫媒病毒，由于缺乏快速鉴别感染病毒血清型的诊断技术，导致异型交叉感染引起重症登革出血热病例居高不下。为实现免疫学方法快速鉴别诊断不同血清型DENV感染，本研究采用哺乳动物细胞293T表达并纯化了4种DENV血清型NS1蛋白，免疫小鼠后通过杂交瘤技术制备了针对NS1蛋白的单克隆抗体。利用酶联免疫吸附方法 (Enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA)、间接免疫荧光法 (Indirect immunofluorescence assay，IFA)、免疫斑点杂交试验 (Dot blotting) 以及蛋白质免疫印迹试验 (Western blotting) 确认所制备的单克隆抗体能够有效识别天然病毒NS1以及重组NS1蛋白。获得的单克隆抗体包含2株可识别1–4型DENV NS1蛋白的通用型抗体及3株分别针对DENV-1、DENV-2和DENV-4的血清型特异抗体。以所制备的DENV NS1抗体为基础，采用双抗体夹心ELISA可快速鉴别不同血清型DENV。DENV血清型特异单克隆抗体的制备和甄别DENV血清型ELISA方法的建立为快速鉴别感染DENV血清型的临床诊断奠定了基础。
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| 关 键 词： | 登革病毒，NS1蛋白，单克隆抗体，血清型特异 |
| 收稿时间： | 2020/3/12 0:00:00 |
Development and characterization of serotype-specific monoclonal antibodies against Dengue virus NS1 |
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| Yang Liu,Yuan Zhang,Yanqiu Wei,Xiaojuan Ji,Qijun Chen,Weijun Liu,Limin Yang.Development and characterization of serotype-specific monoclonal antibodies against Dengue virus NS1[J].Chinese Journal of Biotechnology,2020,36(10):2206-2215. |
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| Authors: | Yang Liu Yuan Zhang Yanqiu Wei Xiaojuan Ji Qijun Chen Weijun Liu Limin Yang |
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| Institution: | 1 Shenyang Agricultural University, Shenyang 110866, Liaoning, China;2 Key Laboratory of Pathogenic Microbiology and Immunology, Institute of Microbiology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China;2 Key Laboratory of Pathogenic Microbiology and Immunology, Institute of Microbiology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China;5 Anhui University, Hefei 230601, Anhui, China;4 The Biological Safety Level-3 (BSL-3) Laboratory of Institute of Microbiology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China;2 Key Laboratory of Pathogenic Microbiology and Immunology, Institute of Microbiology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China;3 University of Chinese Academy of Sciences, Beijing 100049, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Dengue virus NS1 protein monoclonal antibody serotype-specific |
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