| 人清道夫受体AII胞外部分在毕赤酵母(Pichia pastoris)中的分泌表达 |
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| 引用本文： | 刘明,洪斌,巫晔翔,王丽非,司书毅,李元.人清道夫受体AII胞外部分在毕赤酵母(Pichia pastoris)中的分泌表达[J].生物工程学报,2004,20(6):868-874. |
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| 作者姓名： | 刘明 洪斌 巫晔翔 王丽非 司书毅 李元 |
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| 作者单位： | 中国协和医科大学中国医学科学院医药生物技术研究所,北京,100050 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金重点项目，“十五”国家重大专项创新药物与中药现代化资助 (No.3 993 0 190 ,No.2 0 0 2AA2Z3 43D)~~ |
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| 摘 要： | 清道夫受体A(SR-A)介导巨噬细胞无限制摄取修饰的低密度脂蛋白(mLDL)形成泡沫细胞，继而形成动脉粥样硬化病灶，在动脉粥样硬化的发生、发展过程中具有重要作用，被认为是治疗动脉粥样硬化的潜在靶点。本文应用RT-PCR方法扩增得到编码人Ⅱ型SR-A胞外部分(shSR-AII)的cDNA，将其克隆至毕赤酵母(Pichia pastoris)分泌表达载体pPIC9K构建重组表达质粒p9K-shSR-AII。将重组表达质粒线性化后，电转化毕赤酵母GS115，用原位双膜法筛选获得高表达shSR-AII的重组菌株GS115／p9K-shSR-AII。重组菌株经1％甲醇诱导，SDS-PAGE、Western blot分析表明shSR-AII获得了分泌表达。Ligand binding blot结果表明表达的shSR-AII具有与配基oxLDL结合的生物活性。U937泡沫细胞模型进一步表明shSR-AII可通过竞争性结合oxLDL来抑制泡沫细胞的形成，为以shSR-AII为靶点建立抗动脉粥样硬化药物筛选模型奠定了基础。
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| 关 键 词： | shSR-AII Pichia pastoris 动脉粥样硬化 |
| 文章编号： | 1000-3061(2004)06-0868-07 |
| 修稿时间： | 2004年4月16日 |
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