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人CD96第一个IgV结构域的表达、结晶及晶体学分析
引用本文:姜文婧,张水军,严景华,郭宁.人CD96第一个IgV结构域的表达、结晶及晶体学分析[J].生物工程学报,2013,29(5):657-663.
作者姓名:姜文婧  张水军  严景华  郭宁
作者单位:1. 安徽农业大学生命科学学院,安徽合肥230036;中国科学院微生物研究所中国科学院病原微生物与免疫学重点实验室,北京100101
2. 中国科学院微生物研究所中国科学院病原微生物与免疫学重点实验室,北京,100101
3. 安徽农业大学生命科学学院,安徽合肥,230036
基金项目:国家自然科学基金 (No. 31030030) 资助。
摘    要:CD96(Tactile)是一个主要表达在活化的T细胞、NK细胞上的免疫受体分子。它属于免疫球蛋白超家族,胞外区有3个免疫球蛋白结构域(V1,V2/C和C)。最近的研究表明,CD96的第一个IgV结构域(CD96V1)在细胞粘附和NK细胞介导的杀伤过程中起着重要的作用。文中构建了人类CD96第一个IgV样结构域(hCD96V1)的表达载体,并将它在大肠杆菌BL21(DE3)菌株中以包涵体形式表达。通过包涵体体外复性,得到了CD96可溶性蛋白。分析超速离心结果证明CD96可溶蛋白在体外以二聚体形式存在。采用座滴气相扩散法获得了衍射质量较好的CD96蛋白晶体,衍射分辨率为1.9,晶体属于空间群P21,晶胞参数为a=35.1,B=69.5,C=49.6,α=γ=90°,β=105.4°。CD96晶体及衍射数据的获得为后续的结构和功能研究奠定了基础。

关 键 词:CD96  第一IgV结构域  细胞粘附分子  蛋白纯化  结晶
收稿时间:2012/11/23 0:00:00

Expression, crystallization and crystallographic study of the 1st IgV domain of human CD96
Wenjing Jiang,Shuijun Zhang,Jinghua Yan and Ning Guo.Expression, crystallization and crystallographic study of the 1st IgV domain of human CD96[J].Chinese Journal of Biotechnology,2013,29(5):657-663.
Authors:Wenjing Jiang  Shuijun Zhang  Jinghua Yan and Ning Guo
Institution:1 School of Life Science, Anhui Agricultural University, Hefei 230036, Anhui, China; 2 CAS Key Laboratory of Pathogenic Microbiology and Immunology, Institute of Microbiology , Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China;2 CAS Key Laboratory of Pathogenic Microbiology and Immunology, Institute of Microbiology , Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China;2 CAS Key Laboratory of Pathogenic Microbiology and Immunology, Institute of Microbiology , Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China;1 School of Life Science, Anhui Agricultural University, Hefei 230036, Anhui, China
Abstract:
Keywords:CD96  1st V domain  cell adhesion molecules  protein purification  crystallization
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