| 重组人隐花色素蛋白Ι的表达纯化及其在制备放疗保护剂中的应用 |
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| 引用本文： | 姚辰,盛春姐,刘冬,高诗娟,姜威,余虹燕,李建东,陈慧明,武娇祥,潘长穿,陈帅,黄文林.重组人隐花色素蛋白Ι的表达纯化及其在制备放疗保护剂中的应用[J].生物工程学报,2015,31(1):135-146. |
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| 作者姓名： | 姚辰 盛春姐 刘冬 高诗娟 姜威 余虹燕 李建东 陈慧明 武娇祥 潘长穿 陈帅 黄文林 |
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| 作者单位： | 1.中国科学院微生物研究所 病原微生物与免疫学重点实验室，北京 100101 2.安徽大学 生命科学学院，安徽 合肥 230601,1.中国科学院微生物研究所 病原微生物与免疫学重点实验室，北京 100101,1.中国科学院微生物研究所 病原微生物与免疫学重点实验室，北京 100101,1.中国科学院微生物研究所 病原微生物与免疫学重点实验室，北京 100101,1.中国科学院微生物研究所 病原微生物与免疫学重点实验室，北京 100101,3.中山大学肿瘤防治中心 华南肿瘤学国家重点实验室，广东 广州 510060,1.中国科学院微生物研究所 病原微生物与免疫学重点实验室，北京 100101,1.中国科学院微生物研究所 病原微生物与免疫学重点实验室，北京 100101 2.安徽大学 生命科学学院，安徽 合肥 230601,1.中国科学院微生物研究所 病原微生物与免疫学重点实验室，北京 100101 2.安徽大学 生命科学学院，安徽 合肥 230601,4.四川省肿瘤医院·研究所 肿瘤内科，四川 成都 614000,1.中国科学院微生物研究所 病原微生物与免疫学重点实验室，北京 100101,1.中国科学院微生物研究所 病原微生物与免疫学重点实验室，北京 100101 3.中山大学肿瘤防治中心 华南肿瘤学国家重点实验室，广东 广州 510060 5. 广州达博生物制品有限公司 广东省肿瘤靶向治疗新药研发企业重点实验室，广东 广州 510663 |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展计划 (973计划) (Nos. 2012CB518900, 2011CB504706, 2011CB504805)，国家自然科学基金 (No. 81171572)，“重大新药创制”科技重大专项 (No. 2014ZX09101041)，广东省创新科研团队计划 (No. 2009010058) 资助。 |
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| 摘 要： | 放疗是治疗肿瘤的最常用手段之一,为寻找能够保护肿瘤组织周边正常细胞的放疗保护剂,通过原核表达质粒的构建,利用大肠杆菌BL21(DE3)诱导并成功表达出人隐花色素蛋白Ⅰ(h CRY1)。采用包涵体溶解、梯度透析复性、镍柱亲和纯化以及超滤浓缩的蛋白纯化工艺,1 L菌液可收获10-15 mg纯度超过95%的h CRY1。在Ha Ca T细胞中通过细胞DNA损伤修复中所产生的H2A.X foci荧光强度的定量检测,验证了纯化所得的h CRY1具有射线损伤防护功能;通过对经过h CRY1以及对照蛋白处理后的细胞凋亡情况的检测排除了h CRY1的毒副作用对H2A.X foci荧光强度的影响。这些为进一步研究h CRY1提供了便利条件,也为将h CRY1开发成为新的放疗保护剂提供了理论基础。正1中国科学院微生物研究所病原微生物与免疫学重点实验室,北京1001012安徽大学生命科学学院,安徽合肥2306013中山大学肿瘤防治中心华南肿瘤学国家重点实验室,广东广州5100604四川省肿瘤医院·研究所肿瘤内科,四川成都6140005广州达博生物制品有限公司广东省肿瘤靶向治疗新药研发企业重点实验室,广东广州510663
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| 关 键 词： | 生物节律 包涵体 梯度透析 镍柱亲和纯化 DNA损伤 HaCaT H2A.X foci 免疫荧光 |
| 收稿时间： | 2014/3/21 0:00:00 |
Expression,purification of recombinant human cryptochrome I and its application in preparation of protective agent for radiotherapy |
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| Chen Yao,Chunjie Sheng,Dong Liu,Shijuan Gao,Wei Jiang,Hongyan Yu,Jiandong Li,Huiming Chen,Jiaoxiang Wu,Changchuan Pan,Shuai Chen and Wenlin Huang.Expression,purification of recombinant human cryptochrome I and its application in preparation of protective agent for radiotherapy[J].Chinese Journal of Biotechnology,2015,31(1):135-146. |
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| Authors: | Chen Yao Chunjie Sheng Dong Liu Shijuan Gao Wei Jiang Hongyan Yu Jiandong Li Huiming Chen Jiaoxiang Wu Changchuan Pan Shuai Chen and Wenlin Huang |
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| Institution: | 1.CAS Key Laboratory of Pathogenic Microbiology and Immunology, Institute of Microbiology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China 2.School of Life Sciences, Anhui University, Hefei 230601, Anhui, China,1.CAS Key Laboratory of Pathogenic Microbiology and Immunology, Institute of Microbiology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China,1.CAS Key Laboratory of Pathogenic Microbiology and Immunology, Institute of Microbiology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China,1.CAS Key Laboratory of Pathogenic Microbiology and Immunology, Institute of Microbiology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China,1.CAS Key Laboratory of Pathogenic Microbiology and Immunology, Institute of Microbiology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China,3.State Key Laboratory of Oncology in South China, Cancer Center, Sun Yat-Sen University, Guangzhou 510060, Guangdong, China,1.CAS Key Laboratory of Pathogenic Microbiology and Immunology, Institute of Microbiology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China,1.CAS Key Laboratory of Pathogenic Microbiology and Immunology, Institute of Microbiology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China 2.School of Life Sciences, Anhui University, Hefei 230601, Anhui, China,1.CAS Key Laboratory of Pathogenic Microbiology and Immunology, Institute of Microbiology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China 2.School of Life Sciences, Anhui University, Hefei 230601, Anhui, China,4.Medical Oncology, Sichuan Cancer Hospital and Institute, Chengdu 614000, Sichuan, China,1.CAS Key Laboratory of Pathogenic Microbiology and Immunology, Institute of Microbiology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China and 1.CAS Key Laboratory of Pathogenic Microbiology and Immunology, Institute of Microbiology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China 3.State Key Laboratory of Oncology in South China, Cancer Center, Sun Yat-Sen University, Guangzhou 510060, Guangdong, China 5.The Key Laboratory of Tumor Targeted Medicine in Guangdong Province, Guangzhou Double Bio-product Inc, Guangzhou 510663, Guangdong, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | biological rhythm inclusion bodies gradient dialysis Ni-NTA DNA damage HaCaT H2A X foci immunofluorescence |
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