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篮状菌Talaromyces leycettanus JCM12802来源的高温葡萄糖淀粉酶性质与结构
引用本文:郭玉杰,涂涛,邱锦,彤丽格,罗会颖,姚斌.篮状菌Talaromyces leycettanus JCM12802来源的高温葡萄糖淀粉酶性质与结构[J].生物工程学报,2019,35(4):616-625.
作者姓名:郭玉杰  涂涛  邱锦  彤丽格  罗会颖  姚斌
作者单位:中国农业科学院饲料研究所,北京 100081,中国农业科学院饲料研究所,北京 100081,中国农业科学院饲料研究所,北京 100081,中国农业科学院饲料研究所,北京 100081,中国农业科学院饲料研究所,北京 100081,中国农业科学院饲料研究所,北京 100081
基金项目:中国农业科学院协同创新项目 (No. CAAS-463 XTCX2016011-04-5) 资助。
摘    要:葡萄糖淀粉酶作为淀粉糖化的关键用酶之一,广泛应用于食品、医药和发酵工业等行业。由于整个制糖过程都是在高温下完成的,因此对葡萄糖淀粉酶的反应温度和热稳定性有较高要求。本研究从嗜热篮状菌Talaromyces leycettanus JCM12802中克隆到一个糖苷水解酶第15家族(GH15)葡萄糖淀粉酶基因(Tlga15A)并在毕赤酵母GS115中实现异源表达。重组葡萄糖淀粉酶TlGA的最适pH为4.5,在75℃下表现出最高酶活。TlGA热稳定性好,65℃条件下处理1 h剩余70%以上酶活力;70℃处理30min后仍有43%酶活力。TlGA有较强的离子抗性和宽泛的底物特异性,TlGA水解可溶性淀粉、支链淀粉、糖原、糊精和普鲁兰的比活力分别为(255.6±15.3) U/mg、(342.3±24.7) U/mg、(185.4±12.5) U/mg、(423.3±29.3) U/mg和(65.7±8.1) U/mg。从葡萄糖淀粉酶TlGA的一级结构、二级结构和三级结构3个层面对其进行比较分析,发现一级结构中较少的Gly组成和三级结构中较低的非极性基团溶剂可及表面积可能是维持葡萄糖淀粉酶TlGA温度稳定性的主要原因。综合其性质特点和对结构的分析,葡萄糖淀粉酶TlGA在工业葡萄糖生产中有较大应用潜力。

关 键 词:篮状菌,高温葡萄糖淀粉酶,克隆表达,性质特点,结构分析
收稿时间:2018/8/15 0:00:00

Characterization and structure of a novel thermostable glucoamylase from Talaromyces leycettanus JCM12802
Yujie Guo,Tao Tu,Jin Qiu,Lige Tong,Huiying Luo and Bin Yao.Characterization and structure of a novel thermostable glucoamylase from Talaromyces leycettanus JCM12802[J].Chinese Journal of Biotechnology,2019,35(4):616-625.
Authors:Yujie Guo  Tao Tu  Jin Qiu  Lige Tong  Huiying Luo and Bin Yao
Institution:Feed Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100081, China,Feed Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100081, China,Feed Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100081, China,Feed Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100081, China,Feed Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100081, China and Feed Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100081, China
Abstract:
Keywords:Talaromyces leycettanus  thermostable glucoamylase  cloning and expression  characterization  structural analysis
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