| 重组虎纹捕鸟蛛毒素Ⅰ在巴氏毕赤酵母中的表达及纯化 |
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| 引用本文： | 聂东宋,李敏,徐辉明,何宁佳,梁宋平.重组虎纹捕鸟蛛毒素Ⅰ在巴氏毕赤酵母中的表达及纯化[J].生物工程学报,2002,18(2). |
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| 作者姓名： | 聂东宋 李敏 徐辉明 何宁佳 梁宋平 |
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| 作者单位： | 1. 湖南师范大学生命科学学院,长沙,410081
2. 湖南师范大学生命科学学院,长沙,410081;福建师范大学生物工程学院,福州,350007 |
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| 摘 要： | 纹捕鸟蛛毒素Ⅰ是从虎纹捕鸟蛛粗毒中分离纯化，具有镇痛活性的肽类神经毒素。对巴氏毕赤酵母生产的重组HWTX-Ⅰ进行多步纯化，首先将分泌到培养上清的rHWTX-Ⅰ进行90％饱和度的（NH4）2SO4沉淀，再用截留分子量3kD的滤膜脱盐，再用CM阳离子交换层析分离，最后用C18反相层析脱盐纯化，真空干燥后得到的rHWTX-Ⅰ经Tricine SDS-PAGE,质谱鉴定,氨基酸组成分析，N-端序列测定及活性鉴定,证明已获得高纯度的重组HWTX-Ⅰ，摇瓶表达量约为80mg/L，约占总分泌量的23.6%，并对摇瓶发酵条件进行了优化，为利用基因工程方法生产HWTX－I的规模化生产及临床应用提供了证据。
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| 关 键 词： | 重组虎纹捕鸟蛛毒素Ⅰ（rHWTXⅠ），Pichia pastoris，分泌表达，分离纯化 |
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