cGAS/STING信号通路参与猪圆环病毒2型诱导猪肺泡巨噬细胞产生Ⅰ型干扰素

为研究猪圆环病毒2型 (Porcine circovirus type 2，PCV2) 感染的猪肺泡巨噬细胞 (Porcine alveolar macrophages，PAMs) 分泌Ⅰ型干扰素信号通路，以PCV2病毒感染PAMs为研究对象，采用酶联免疫吸附测定 (Enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA)、实时荧光定量PCR和Western blotting，分析PCV2感染对PAMsⅠ型干扰素的诱导、cGAS/STING信号通路相关基因mRNA和蛋白表达的影响，并应用靶向cGAS和STING特异性siRNA、抑制剂BX795和BAY 11-7082，解析cGAS、STING、TBK1和NF-κB/P65在PAMs生成Ⅰ型干扰素中的作用。结果显示，PAMs感染PCV2病毒48 h后Ⅰ型干扰素的表达量显著升高 (P＜0.05)，cGAS mRNA的表达量在感染48 h和72 h后显著升高 (P＜0.01)，STING mRNA表达量在PCV2感染72 h后显著上升 (P＜0.01)，TBK1 mRNA、IRF3 mRNA感染48 h后显著升高 (P＜0.01)。PCV2能够显著升高PAMs胞浆STING、TBK1和IRF3蛋白含量，降低胞浆NF-κB/p65的含量，促进NF-κB/p65和IRF3入核。敲低PAMs中cGAS或STING表达水平后，PCV2感染PAMs 48 h后，Ⅰ型干扰素的表达水平显著下降 (P＜0.01)；BAX795抑制TBK1后，PCV2感染PAMs 48 hⅠ型干扰素的表达水平显著下降 (P＜0.01)，BAY 11-7082 抑制NF-κB/P65表达后，PCV2感染PAMs 48 h I型干扰素的表达量与PCV2组相比无显著性差异 (P＞0.05)。结果表明，PAMs感染PCV2后通过cGAS/STING/TBK1/IRF3信号通路诱导Ⅰ型干扰素分泌。