抗肿瘤血管三结构域单链抗体VH/L的构建与表达

以本室研制的一株抗肿瘤血管单克隆抗体AA98为基础，采用PCR扩增抗体AA98基因的重链可变区(V_H)和轻链(L)，以重链恒定区1(C_H1)5′端12个氨基酸的序列作为连接肽，并将连接肽中的Lys突变为Ser，构建VH连接肽-L三结构域单链抗体。重组VH/L单链抗体在大肠杆菌中得到了高效表达，其表达量占菌体总蛋白质的20%。表达的蛋白质在菌内形成包含体，经凝胶过滤法复性，获得了有抗原结合活性的V_H/L。该三结构域单链抗体的成功构建和复性，为重组抗体片段的研制提供了借鉴。