| SARS-CoV-2 N蛋白不同片段制备及其在荧光层析中的应用 |
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| 引用本文： | 李登州,王云龙,张怡青,王继创,卢瑶,李果,李永伟,李玉林,张恒,王晓军.SARS-CoV-2 N蛋白不同片段制备及其在荧光层析中的应用[J].生物工程学报,2021,37(11):4066-4074. |
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| 作者姓名： | 李登州 王云龙 张怡青 王继创 卢瑶 李果 李永伟 李玉林 张恒 王晓军 |
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| 作者单位： | 1 河南中医药大学第二临床医学院，河南 郑州 450000;2 河南省生物工程技术研究中心，河南 郑州 450000;4 郑州职业技术学院，河南 郑州 450010;3 南阳农业职业学院，河南 南阳 473000;5 河南省职工医院，河南 郑州 450002 |
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| 基金项目： | 郑州市新型冠状病毒防控应急科研攻关项目 (No. 2020YJGG0007) 资助。 |
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| 摘 要： | 表达纯化新型冠状病毒核衣壳 (N) 蛋白不同片段，建立新冠病毒总抗体荧光免疫层析方法并评价不同蛋白片段对该方法的影响。利用生物信息学技术对N蛋白序列进行分析、合成及原核表达、纯化，制备不同N蛋白片段；采用1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺 (1-(3-Dimethylaminopropyl)-3-ethylcarbodiimide hydrochloride，EDC) 法荧光微球偶联抗原建立夹心荧光层析抗体检测方法，并分别进行性能评价。在制备的4个N蛋白片段中优选出全长N蛋白 (N419) 包被，N412加入0.5 mol/L NaCl进行标记作为最优组合；删掉N抗原N端第91–120位氨基酸 (N412) 可减少87.5%的非特异性干扰；线性范围为0.312–80 U/L，最低检出限为0.165 U/L，准确度在95%以上。优选配对N蛋白片段建立的新冠病毒总抗体荧光免疫层析检测方法，与广州万孚试纸条对比总符合率为98%，有望用于新型冠状病毒的辅助检测，同时为新冠抗体检测试剂性能的提升提供实验依据和借鉴。
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| 关 键 词： | 新型冠状病毒，抗体检测，核衣壳蛋白，荧光免疫层析 |
| 收稿时间： | 2021/2/5 0:00:00 |
Preparation of different fragments of SARS-CoV-2 N protein and its application in fluorescence chromatography |
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| Dengzhou Li,Yunlong Wang,Yiqing Zhang,Jichuang Wang,Yao Lu,Guo Li,Yongwei Li,Yulin Li,Heng Zhang,Xiaojun Wang.Preparation of different fragments of SARS-CoV-2 N protein and its application in fluorescence chromatography[J].Chinese Journal of Biotechnology,2021,37(11):4066-4074. |
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| Authors: | Dengzhou Li Yunlong Wang Yiqing Zhang Jichuang Wang Yao Lu Guo Li Yongwei Li Yulin Li Heng Zhang Xiaojun Wang |
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| Institution: | 1 Second Clinical Medical College, Henan University of Traditional Chinese Medicine, Zhengzhou 450000, Henan, China;2 Henan Bioengineering Technology Research Center, Zhengzhou 450000, Henan, China;4 Zhengzhou Technical College, Zhengzhou 450010, Henan, China;3 Nanyang Agricultural Vocational College, Nanyang 473000, Henan, China;5 Henan Provincial Staff Hospital, Zhengzhou 450002, Henan, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | SARS-CoV-2 antibody detection nucleocapsid protein fluorescence immunechromatography |
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