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toxR基因作为荧光定量PCR靶基因设计TaqMan探针快速检测副溶血弧菌
引用本文:覃倚莹,吴晖,肖性龙,杨晓泉,张经纬,余以刚,李惠芳.toxR基因作为荧光定量PCR靶基因设计TaqMan探针快速检测副溶血弧菌[J].生物工程学报,2008,24(10):1837-1842.
作者姓名:覃倚莹  吴晖  肖性龙  杨晓泉  张经纬  余以刚  李惠芳
作者单位:1. 华南理工大学轻工与食品学院,广州,510640
2. 华南理工大学轻工与食品学院,广州510640;深圳太太基因工程有限公司,深圳518057
3. 深圳太太基因工程有限公司,深圳,518057
基金项目:教育部跨世纪优秀人才培养计划,广东省粤港招标项目,省部产学研合作专项资金项目
摘    要:以toxR基因为靶基因,通过优化反应条件建立了快速检测副溶血弧茵的TaqMan实时荧光PCR方法.特异性试验表明,该方法能选择性检测副溶血弧茵,而与金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、单增李斯特杆菌等多种常见的食源性病原茵没有交叉反应:灵敏度试验表明,该方法最少可检测到25个拷贝的toxR基因重组质粒,对纯培养物和模拟食品样品直接检测的灵敏度分别为21 cfu/mL和210 cfu/g;重复性试验表明,同一样品于试验内及试验间的变异系数分别为0.9%和1.3%:所制作的标准曲线在2.5 × 101~2.5 × 106拷贝数之间有较好的线性关系,能对副溶血孤菌进行准确的定量分析.结果表明,本研究所建立的副溶血弧菌实时荧光PCR检测方法具有特异性好,灵敏度高、重复性好的特点,能进行定量检测,而且检测时间从核酸抽提到出实验结果仅需要3 h.是快速检测副溶血弧菌的有效手段.

关 键 词:副溶血性弧菌  实时荧光定量PCR  toxR基因  TaqMan探针  检测
收稿时间:2008/3/28 0:00:00

Rapid Detection of Vibrio parahaemolyticus by TaqMan-based Real-time PCR Assay Targeting the toxR Gene
Yiying Qin,Hui Wu,Xinglong Xiao,Xiaoquan Yang,Jingwei Zhang,Yigang Yu and Huifang Li.Rapid Detection of Vibrio parahaemolyticus by TaqMan-based Real-time PCR Assay Targeting the toxR Gene[J].Chinese Journal of Biotechnology,2008,24(10):1837-1842.
Authors:Yiying Qin  Hui Wu  Xinglong Xiao  Xiaoquan Yang  Jingwei Zhang  Yigang Yu and Huifang Li
Institution:College of Light Industry & Food, South China University of Technology, Guangzhou 510640, China;College of Light Industry & Food, South China University of Technology, Guangzhou 510640, China;College of Light Industry & Food, South China University of Technology, Guangzhou 510640, China; Shenzhen Taitai Genomics. Inc, Shenzhen 518057, China;College of Light Industry & Food, South China University of Technology, Guangzhou 510640, China;Shenzhen Taitai Genomics. Inc, Shenzhen 518057, China;College of Light Industry & Food, South China University of Technology, Guangzhou 510640, China;Shenzhen Taitai Genomics. Inc, Shenzhen 518057, China
Abstract:
Keywords:Vibrio parahaemolyticus  real-time PCR  TaqMan-based probe  toxR gene  detection
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