丹参悬浮培养细胞原生质体的制备和活力检测 |
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引用本文: | 朱楠,刘俊,张馨宇,董娟娥.丹参悬浮培养细胞原生质体的制备和活力检测[J].生物工程学报,2014,30(10):1612-1621. |
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作者姓名: | 朱楠 刘俊 张馨宇 董娟娥 |
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作者单位: | 西北农林科技大学生命科学学院,陕西 杨凌 712100;西北农林科技大学生命科学学院,陕西 杨凌 712100;西北农林科技大学生命科学学院,陕西 杨凌 712100;西北农林科技大学生命科学学院,陕西 杨凌 712100 |
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基金项目: | 国家自然科学基金 (No. 31170274),西北农林科技大学青年骨干支持计划资助。 |
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摘 要: | 对丹参悬浮培养细胞原生质体制备条件进行了研究,并利用FDA染色和钙离子荧光探针Fluo-3/AM装载对制备得到的原生质体的活力和功能进行了检测。丹参悬浮培养细胞原生质体的制备条件为:悬浮培养细胞酶解的适宜酶液组合为纤维素酶1.5%、果胶酶0.3%和离析酶0.5%;适宜的甘露醇浓度为0.4 mol/L;酶解时间为12 h;在600 r/min转速下离心5 min收集,纯化得到原生质体,其产量为1.1×106/g FW,FDA检测显示其活力为95%以上,荧光探针Fluo-3/AM可成功装载到原生质体中。
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关 键 词: | 丹参 原生质体 激光共聚焦 FDA Fluo-/AM |
收稿时间: | 1/8/2014 12:00:00 AM |
Preparation and vitality detection of protoplast in Salvia miltiorrhiza Bunge |
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Institution: | College of Life Sciences, Northwest Agricultural and Forestry University, Yangling 712100, Shaanxi, China;College of Life Sciences, Northwest Agricultural and Forestry University, Yangling 712100, Shaanxi, China;College of Life Sciences, Northwest Agricultural and Forestry University, Yangling 712100, Shaanxi, China;College of Life Sciences, Northwest Agricultural and Forestry University, Yangling 712100, Shaanxi, China |
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Abstract: | |
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Keywords: | Salvia miltiorrhiza Bunge protoplast laser confocal microscopy FDA Fluo-3/AM |
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