| L929细胞条件培养基诱导培养的小鼠原代巨噬细胞生物学特性对比 |
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| 引用本文： | 王伟,秦贻,王亚茹,邹节节,陈静,陈金武,张雁,耿明,徐忠东,戴敏,潘礼龙.L929细胞条件培养基诱导培养的小鼠原代巨噬细胞生物学特性对比[J].生物工程学报,2020,36(7):1431-1439. |
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| 作者姓名： | 王伟 秦贻 王亚茹 邹节节 陈静 陈金武 张雁 耿明 徐忠东 戴敏 潘礼龙 |
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| 作者单位： | 1合肥师范学院 生命科学学院，安徽 合肥 230601;2安徽中医药大学 药学院，安徽 合肥 230012;3江南大学 医学院，江苏 无锡 214122 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(Nos. 81973322，81573420，81773937)，安徽省自然科学基金 (Nos. 2008085MH270，1908085MH263)，安徽省高等学校优秀青年人才基金 (Nos. gxyqZD2016235，gxgnfx2019025)，国家级大学生创新创业训练计划项目 (No. 201814098058) 资助。 |
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| 摘 要： | 本研究旨在对比分析小鼠骨髓源巨噬细胞 (BMDM) 和腹腔巨噬细胞 (PM) 原代培养及巨噬细胞生物学特性差异，为合理选择原代巨噬细胞培养方法提供参考依据。原代培养小鼠BMDM和PM，细胞计数仪测定细胞数量，倒置显微镜观察形态学变化，流式细胞仪检测细胞纯度，CCK-8法测定细胞增殖，中性红吞噬实验测定细胞吞噬功能，实时荧光定量PCR分析巨噬细胞表型变化。结果显示，BMDM原代培养获取的细胞数量显著高于PM (P<0.01)，PM贴壁及伸展时间早于BMDM。BMDM中F4/80+CD11b+百分比 (98.30%±0.53%) 高于PM (94.83%±1.42%)，但无统计学差异 (P>0.05)。在L929细胞条件培养基培养体系中，BMDM增殖能力显著高于PM (P<0.001)。吞噬实验发现，基础状态下BMDM吞噬能力显著高于PM (P<0.01)，经LPS刺激24 h后，除低剂量LPS (0.1 μg/mL) 外，BMDM吞噬能力均显著高于PM (P<0.01或P<0.001)，提示BMDM吞噬能力在基础和激活状态下均强于PM。巨噬细胞极化实验发现，基础状态下Tnfα在BMDM中表达显著高于PM (P<0.001)，Arg1和Ym1在BMDM中表达显著低于PM (P<0.001)，这一差异在极化诱导剂 (LPS+IFN-γ或IL-4) 处理后依然存在。上述结果表明，原代培养BMDM较PM可获取更多细胞，且两种细胞在吞噬功能和极化状态上存在一定生物学差异，应谨慎合理选择巨噬细胞原代培养方法。
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| 关 键 词： | 巨噬细胞，原代培养，增殖，吞噬功能，极化 |
| 收稿时间： | 2019/11/19 0:00:00 |
Characteristic comparison of mouse primary macrophages cultured in L929 cell conditioned medium |
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| Wei Wang,Yi Qin,Yaru Wang,Jiejie Zou,Jing Chen,Jinwu Chen,Yan Zhang,Ming Geng,Zhongdong Xu,Min Dai,Lilong Pan.Characteristic comparison of mouse primary macrophages cultured in L929 cell conditioned medium[J].Chinese Journal of Biotechnology,2020,36(7):1431-1439. |
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| Authors: | Wei Wang Yi Qin Yaru Wang Jiejie Zou Jing Chen Jinwu Chen Yan Zhang Ming Geng Zhongdong Xu Min Dai Lilong Pan |
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| Institution: | 1 School of Life Sciences, Hefei Normal University, Hefei 230601, Anhui, China;2 School of Pharmacy, Anhui University of Chinese Medicine, Hefei 230012, Anhui, China; 3 School of Medicine, Jiangnan University, Wuxi 214122, Jiangsu, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | macrophages primary culture proliferation phagocytosis polarization |
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