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须糖多孢菌Saccharopolyspora pogona的核糖体工程改造对丁烯基多杀菌素合成的影响
引用本文:罗林根,杨燕,魏慧,穰杰,唐琼,胡胜标,孙运军,余子全,丁学知,夏立秋.须糖多孢菌Saccharopolyspora pogona的核糖体工程改造对丁烯基多杀菌素合成的影响[J].生物工程学报,2016,32(2):259-263.
作者姓名:罗林根  杨燕  魏慧  穰杰  唐琼  胡胜标  孙运军  余子全  丁学知  夏立秋
作者单位:湖南师范大学生命科学学院 微生物分子生物学国家重点实验室培育基地,湖南 长沙 410081,湖南师范大学生命科学学院 微生物分子生物学国家重点实验室培育基地,湖南 长沙 410081,湖南师范大学生命科学学院 微生物分子生物学国家重点实验室培育基地,湖南 长沙 410081,湖南师范大学生命科学学院 微生物分子生物学国家重点实验室培育基地,湖南 长沙 410081,湖南师范大学生命科学学院 微生物分子生物学国家重点实验室培育基地,湖南 长沙 410081,湖南师范大学生命科学学院 微生物分子生物学国家重点实验室培育基地,湖南 长沙 410081,湖南师范大学生命科学学院 微生物分子生物学国家重点实验室培育基地,湖南 长沙 410081,湖南师范大学生命科学学院 微生物分子生物学国家重点实验室培育基地,湖南 长沙 410081,湖南师范大学生命科学学院 微生物分子生物学国家重点实验室培育基地,湖南 长沙 410081,湖南师范大学生命科学学院 微生物分子生物学国家重点实验室培育基地,湖南 长沙 410081
基金项目:国家国际合作重点项目 (No. 0102011DFA32610),国家重点基础研究发展计划 (973计划) (No. 2011CB111680),国家高技术研究发展计划 (863计划) (No. NC2010GA0091),湖南省协同创新中心项目 (No. 20134486) 资助。
摘    要:核糖体工程是以微生物的各类抗生素抗性突变为筛选标记,高效获得次生代谢产物合成能力提高的突变株的一种育种新方法。通过核糖体工程技术,使用链霉素对须糖多孢菌Saccharopolyspora pogona进行抗性选育,以获得高产丁烯基多杀菌素突变菌株。对原始菌株和所获得的突变菌株代谢产物的研究发现,相对于原始菌株,其中突变株S13的丁烯基多杀菌素产量提高幅度最大,相比原始菌株提高了1.79倍。经质谱测定表明,其代谢物中比原始菌株多了一种丁烯基多杀菌素组分Spinosynα1。对抗性突变株S13的DNA序列进行分析,发现在编码核糖体S12蛋白的rps L基因保守区域中出现点突变,第314位和第320位的胞嘧啶(C)分别突变为腺嘌呤(A)和胸腺嘧啶(T),对应的氨基酸残基分别由脯氨酸突变为谷氨酰胺,丙氨酸突变为缬氨酸。研究显示,突变株S13遗传稳定性良好。

关 键 词:核糖体工程,放线菌,丁烯基多杀菌素,链霉素,次级代谢
收稿时间:2015/4/12 0:00:00

Effect of ribosome engineering on butenyl-spinosyns synthesis of Saccharopolyspora pogona
Lin''gen Luo,Yan Yang,Hui Wei,Jie Rang,Qiong Tang,Shengbiao Hu,Yunjun Sun,Ziquan Yu,Xuezhi Ding and Liqiu Xia.Effect of ribosome engineering on butenyl-spinosyns synthesis of Saccharopolyspora pogona[J].Chinese Journal of Biotechnology,2016,32(2):259-263.
Authors:Lin'gen Luo  Yan Yang  Hui Wei  Jie Rang  Qiong Tang  Shengbiao Hu  Yunjun Sun  Ziquan Yu  Xuezhi Ding and Liqiu Xia
Institution:College of Life Science, Hunan Normal University, State Key Laboratory Breeding Base of Microbial Molecular Biology, Changsha 410081, Hunan, China,College of Life Science, Hunan Normal University, State Key Laboratory Breeding Base of Microbial Molecular Biology, Changsha 410081, Hunan, China,College of Life Science, Hunan Normal University, State Key Laboratory Breeding Base of Microbial Molecular Biology, Changsha 410081, Hunan, China,College of Life Science, Hunan Normal University, State Key Laboratory Breeding Base of Microbial Molecular Biology, Changsha 410081, Hunan, China,College of Life Science, Hunan Normal University, State Key Laboratory Breeding Base of Microbial Molecular Biology, Changsha 410081, Hunan, China,College of Life Science, Hunan Normal University, State Key Laboratory Breeding Base of Microbial Molecular Biology, Changsha 410081, Hunan, China,College of Life Science, Hunan Normal University, State Key Laboratory Breeding Base of Microbial Molecular Biology, Changsha 410081, Hunan, China,College of Life Science, Hunan Normal University, State Key Laboratory Breeding Base of Microbial Molecular Biology, Changsha 410081, Hunan, China,College of Life Science, Hunan Normal University, State Key Laboratory Breeding Base of Microbial Molecular Biology, Changsha 410081, Hunan, China and College of Life Science, Hunan Normal University, State Key Laboratory Breeding Base of Microbial Molecular Biology, Changsha 410081, Hunan, China
Abstract:
Keywords:ribosome engineering  actinomycetes  butenyl-spinosyns  streptomycin  secondary metabolism
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