新的热带假丝酵母载体-宿主系统的建立

热带假丝酵母(Candida tropicalis)是一种可以利用多种非糖碳源代谢的微生物，在石油发酵、石油化工生产领域已得到长期应用^1]。随着分子生物学研究技术的发展。通过代谢工程技术改变热带假丝酵母的代谢途径和流向．发展出能够把石油中的烃类物质发酵转化成各种重要化工原料、中间体的新型生产菌株，已普遍受到国内外研究机构的重视。另一方面，热带假丝酵母具有细胞生长密度高，分泌蛋白能力强等特点，可以发展成一个重要的异源蛋白表达体系。建立稳定高效的热带假丝酵母载体一宿主系统是实现上述构想的前提和关键。迄今为止，在热带假丝酵母细胞内尚未发现能游离于染色体外自主复制的天然质粒存在。目前已有20余种热带假丝酵母基因被克隆和鉴定。大部分与热带假丝酵母的氧化代谢过程有关，其中5个过氧物酶体蛋白基因的结构和2个细胞色素P450系统基因的表达调控规律巳被阐明^2-5]，与DNA复制过程有关的基因或功能序列均未见报道。本文研究和探索Candida属其他微生物基因元件在热带假酵母中的功能作用，选用热带假丝酵母细胞色素P450单加氧酶基因的启动子和侧翼调控序列^3]，构建了一套新的热带假丝酵母载体一宿主系统，并成功地表达了小鼠CYPlAl基因。