β2m基因敲除小鼠构建 |
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引用本文: | 李振,孙瑞林,刘雯.β2m基因敲除小鼠构建[J].生物工程学报,2021,37(8):2924-2935. |
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作者姓名: | 李振 孙瑞林 刘雯 |
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作者单位: | 1 复旦大学 基础医学院细胞与遗传医学系,上海 200300;2 上海南方模式生物科技股份有限公司,上海 201318 |
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摘 要: | β2m (Beta-2-microglobulin)基因编码一个非糖基化蛋白,作为主要组织相容性复合体1类 (MHCⅠ) 的重要组分,发挥抗原递呈的作用。为了避免免疫介导的清除,人类肿瘤和病原体采取了不同的策略,其中包括MHCⅠ表达的丢失。合适的动物模型对于评估和开发肿瘤及其他疾病的临床治疗新方法,以及阐明目前临床有效治疗方法的机制至关重要。利用CRISPR/Cas9基因编辑、显微注射等方法构建了β2m基因敲除小鼠。随后,通过PCR鉴定、qPCR、流式分析等实验技术进行基因型和表型鉴定。基因型鉴定结果显示在该品系小鼠中,目的基因编码区目标区域缺失。qPCR检测发现,β2m的mRNA水平发生显著的下调。流式结果显示,在不同的免疫组织和器官中,CD8+杀伤性T细胞显著减少。综上,成功构建β2m基因敲除小鼠,为后续体内研究β2m基因的功能奠定了基础。
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关 键 词: | 主要组织相容性复合物,β2m,基因敲除小鼠,CRISPR/Cas9 |
收稿时间: | 2020/10/2 0:00:00 |
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