| 蜘蛛多肽毒素JZTX-51和JZTX-26的重组表达和纯化 |
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| 引用本文： | 邵婕,潘娇,瞿芳,刘子昊,丁易颖,罗莎,张学文,陈金军.蜘蛛多肽毒素JZTX-51和JZTX-26的重组表达和纯化[J].生物工程学报,2018,34(10):1668-1678. |
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| 作者姓名： | 邵婕 潘娇 瞿芳 刘子昊 丁易颖 罗莎 张学文 陈金军 |
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| 作者单位： | 湖南农业大学生物科学技术学院 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金 (Nos. 31672457, 31772865)，湖南省教育厅重点项目 (No. 16A098)，湖南省科技厅重点项目 (No. 2017NK2311)，湖南农业大学大学生创新项目 (No. XCX17071) 资助。 |
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| 摘 要： | 为建立一种简便、快速且能大量获得富含二硫键的蜘蛛多肽毒素JZTX-26 (35 aa)和JZTX-51 (27 aa)的有效方法,利用PCR的方法克隆成熟肽编码基因并插入至大肠杆菌Escherichia coli表达载体pMAL-p2x中与MBP(麦芽糖结合蛋白)标签融合,构建重组表达质粒pMAL-jz26和pMAL-jz51。在受体菌TB1和BL21(DE3)中对两个重组表达质粒分别进行IPTG诱导表达,通过Amylose亲和层析柱纯化并进行SDS-PAGE分析;采用因子X对融合蛋白进行酶切后通过分子筛以及反相高效液相色谱对两种重组蛋白进行纯化。通过MALDI-TOF-TOF质谱鉴定,表达产物的分子量与预期的多肽理论分子量一致。1L表达培养液中能获得大约5mg纯化的目的蛋白JZTX-26或JZTX-51。结果表明利用该原核表达体系可对蜘蛛毒素基因jztx-26和jztx-51进行融合表达,并对重组蛋白进行亲和层析,为采用基因工程的手段大量获得蜘蛛多肽毒素奠定了基础。
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| 关 键 词： | 蜘蛛毒素，原核表达，融合蛋白，DRG细胞，钠离子通道 |
| 收稿时间： | 2017/12/29 0:00:00 |
Recombinant expression and purification of spider toxin, JZTX-51 and JZTX-26, from Chilobrachys jingzhao |
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| Jie Shao,Jiao Pan,Fang Qu,Zihao Liu,Yiying Ding,Sha Luo,Xuewen Zhang and Jinjun Chen.Recombinant expression and purification of spider toxin, JZTX-51 and JZTX-26, from Chilobrachys jingzhao[J].Chinese Journal of Biotechnology,2018,34(10):1668-1678. |
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| Authors: | Jie Shao Jiao Pan Fang Qu Zihao Liu Yiying Ding Sha Luo Xuewen Zhang and Jinjun Chen |
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| Institution: | College of Bioscience and Biotechnology, Hunan Agricultural University, Changsha 410128, Hunan, China,College of Bioscience and Biotechnology, Hunan Agricultural University, Changsha 410128, Hunan, China,College of Bioscience and Biotechnology, Hunan Agricultural University, Changsha 410128, Hunan, China,College of Bioscience and Biotechnology, Hunan Agricultural University, Changsha 410128, Hunan, China,College of Bioscience and Biotechnology, Hunan Agricultural University, Changsha 410128, Hunan, China,College of Bioscience and Biotechnology, Hunan Agricultural University, Changsha 410128, Hunan, China,College of Bioscience and Biotechnology, Hunan Agricultural University, Changsha 410128, Hunan, China and College of Bioscience and Biotechnology, Hunan Agricultural University, Changsha 410128, Hunan, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | spider toxin prokaryotic expression technology fusion protein DRG cell sodium channel |
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