α-氨基酸酯酰基转移酶表达纯化、酶学性质及其催化应用 |
| |
引用本文: | 刘鹏飞,陆启蒙,胡雪芹,侯学文,张洪斌.α-氨基酸酯酰基转移酶表达纯化、酶学性质及其催化应用[J].生物工程学报,2018,34(7):1169-1177. |
| |
作者姓名: | 刘鹏飞 陆启蒙 胡雪芹 侯学文 张洪斌 |
| |
作者单位: | 合肥工业大学生物与医学工程学院 |
| |
基金项目: | 合肥工业大学大学生创新创业训练计划项目 (No. 2017CXCY478),安徽省自主创新专项“秋实计划” (No. 2013AKKG0391) 资助。 |
| |
摘 要: | α-氨基酸酯酰基转移酶(α-amino acid ester acyltransferase,AET)能够催化底物L-丙氨酸甲酯盐酸盐、L-谷氨酰胺合成L-丙氨酰-L-谷氨酰胺(L-alanyl-L-glutamine,丙谷二肽)。利用重组大肠杆菌saet-QC01表达α-氨基酸酯酰基转移酶,对其表达条件进行了优化,通过Ni-NTA亲和层析法分离纯化重组蛋白,并对其酶学性质、催化应用进行了研究。适合酶表达的诱导条件:温度20℃,诱导阶段(OD_(600)=2.0-2.5),IPTG浓度0.6 mmol/L,诱导时间12 h。α-氨基酸酯酰基转移酶的最适反应温度27℃,最适pH 8.5,在pH 7.0-8.0很稳定,在酸性条件下相对稳定,低浓度的Co~(2+)、低浓度的EDTA对酶活有促进作用。在底物浓度丙氨酸甲酯盐酸盐600 mmol/L、谷氨酰胺480 mmol/L,丙谷二肽的产量达到78.2 g/L,生产速率达到1.955 g/(L·min),转化率达到75.0%。α-氨基酸酯酰基转移酶具有良好的酸碱耐受性,催化效率高的优良特性,在工业生产中具有较好的应用潜力。
|
关 键 词: | α-氨基酸酯酰基转移酶,丙谷二肽,表达条件,酶学性质,催化条件 |
收稿时间: | 2018/1/9 0:00:00 |
本文献已被 CNKI 等数据库收录! |
| 点击此处可从《生物工程学报》浏览原始摘要信息 |
| 点击此处可从《生物工程学报》下载免费的PDF全文 |
|