| 葡萄糖异构酶突变体酶GIG138P和GIG138P-G247D在变铅青链霉菌中的高效表达及检测 |
| |
| 引用本文： | 朱国萍,张颖,徐旸,唐建国,徐冲.葡萄糖异构酶突变体酶GIG138P和GIG138P-G247D在变铅青链霉菌中的高效表达及检测[J].生物工程学报,2002,18(3). |
| |
| 作者姓名： | 朱国萍 张颖 徐旸 唐建国 徐冲 |
| |
| 作者单位： | 中国科学技术大学生命科学学院分子生物学与细胞生物学系，合肥 23002 |
| |
| 摘 要： | 将含有G138P单点突变和G138P-G247D双点突变的GI结构基因，分别克隆入E.coli链霉菌穿梭载体pHZ1272，成功构建了穿梭表达载体pHZGI1和pHZGI2。通过原生质体的转化，将穿梭表达载体导入变铅青链霉菌TK54菌株。30℃振荡培养24h，加入2 μg/mL 硫链丝菌素诱导表达12h。SDSPAGE电泳表明，两个穿梭载体在TK54菌株内表达出425 kD特异性条带。薄层扫描显示，突变体酶GIG138P和GIG138PG247D分别约占可溶性蛋白的19%和22%。Western杂交进一步证实GIG138P和GIG138PG247D在变铅青链霉菌TK54中获得了表达。
|
| 关 键 词： | 葡萄糖异构酶， 突变体酶， 穿梭载体， 变铅青链霉菌， 高效表达 |
|
| 点击此处可从《生物工程学报》浏览原始摘要信息 |
| 点击此处可从《生物工程学报》下载免费的PDF全文 |
|
