表位九肽库的构建及人Ⅳ型胶原酶特异结合肽的筛选 |
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引用本文: | 李传昭,杨文定,刘玉乐,王大伟,赵爱民,田波.表位九肽库的构建及人Ⅳ型胶原酶特异结合肽的筛选[J].生物工程学报,1998,14(3):239-245. |
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作者姓名: | 李传昭 杨文定 刘玉乐 王大伟 赵爱民 田波 |
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作者单位: | 中国科学院微生物研究所 北京 100080 |
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基金项目: | 中科院九五预演项目,华北制药集团新药研究开发中心资助 |
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摘 要: | 将人工合成的编码九肽的随机序列DNA片段克隆进丝状噬菌体表达载体FUSE5,经多次电击转化和表达,获得肽段与噬菌体pⅢ蛋白融合并展示在噬菌体表面的随机序列九肽表位肽库。库容量达10 10个克隆。以Ⅳ型胶原酶为靶蛋白,采用亲和纯化筛选模式,从中筛选出Ⅳ型胶原酶结合肽。进一步ELISA检测筛选出与Ⅳ型胶原酶特异结合的20个阳性克隆。序列分析发现一组肽含有WDXXD的共同序列,一组含有WVGXXR的共同序列。其中WDXXD的序列与Ⅳ型胶原酶单链抗体可变区序列同源。结果表明,多肽库是筛选蛋白特异结合肽的有力工具,表位九肽库的构建和筛选方法的建立为进一步应用筛选具有高亲和力的特异结合肽奠定了基础。
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关 键 词: | 表位肽库,九肽,Ⅳ型胶原酶,亲和筛选 |
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