来源于酸热脂环酸杆菌的嗜酸性α-淀粉酶的表达研究 |
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引用本文: | 袁铁铮, 姚斌, 罗会颖, 王亚茹, 伍宁丰, 范云六,.来源于酸热脂环酸杆菌的嗜酸性α-淀粉酶的表达研究[J].生物工程学报,2005,21(1):78-83. |
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作者姓名: | 袁铁铮 姚斌 罗会颖 王亚茹 伍宁丰 范云六 |
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作者单位: | 1. 中国农业科学院饲料研究所,北京,100081 2. 中国农业科学院生物技术研究所,北京,100081 |
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基金项目: | 国家高技术研究与发展计划 (863计划 )项目资助 (No .2 0 0 1AA2 14 0 41)。~~ |
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摘 要: | 从嗜酸耐热的酸热脂环酸杆菌Alicyclobacillusacidocaldarius中克隆到α_淀粉酶的基因 (amy) ,该基因全长 390 3bp ,编码130 1个氨基酸 ,理论分子量约 140kD。将基因amy分别克隆到大肠杆菌E .coli表达载体pET-2.2b(+)和毕赤酵母P .pastoris表达载体pPIC9α ,并在大肠杆菌和毕赤酵母中得到了表达 ,表达产物具有淀粉酶的活性。对酵母中表达的酶蛋白AMY进行了纯化 ,并初步研究了它的酶学性质 ,它的作用最适pH3.2 ,在pH 2.5~4.6范围内 ,酶活性保留 50%以上 ,它的最适温度65℃ ,在 70℃下处理 30min ,酶活性维持50%以上 ,基本保留了天然酶蛋白的耐热性和嗜酸性。位于基因amy内部 +1174~+3288bp的基因片段amy′全长 2115bp ,编码705个氨基酸 ,在E .coli表达后依然具有淀粉酶的活性。
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关 键 词: | 嗜酸性α-淀粉酶 酸热脂环酸杆菌 毕赤酵母 基因表达 |
文章编号: | 1000-3061(2005)01-0078-06 |
修稿时间: | 2004年6月22日 |
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