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| 凝胶过滤与镍柱亲和纯化金葡菌α-溶血素重组蛋白的生物学特性比较 | |
| 引用本文： | 张海燕,杨宏军,王长法,何洪彬,马卫明,杨少华.凝胶过滤与镍柱亲和纯化金葡菌α-溶血素重组蛋白的生物学特性比较[J].生物工程学报,2009,25(2). |
| 作者姓名： | 张海燕 杨宏军 王长法 何洪彬 马卫明 杨少华 |
| 作者单位： | 1. 山东省农业科学院奶牛研究中心,济南250100;山东农业大学动物科技学院,泰安271018 2. 山东省农业科学院奶牛研究中心,济南,250100 3. 山东农业大学动物科技学院,泰安,271018 |
| 基金项目： | 山东省农科院高技术自主创新基金 |
| 摘 要： | 以在宿主菌株BL21(DE3)中成功表达的重组金黄色葡萄球菌α-溶血素蛋白为研究对象,分析比较通过凝胶过滤层析(Gel filtration chromatography)和镍柱亲和层析纯化试剂盒(Ni-NTA spin columns)纯化所得到的重组蛋白的蛋白含量和生物特性方面的差异.SDS-PAGE分析检测纯化产物,Bradford法测定蛋白含量,兔红细胞测定半数溶血效价,结果显示这2种方法得到的纯化产物在53 kD处均呈现单一清晰带,达电泳级纯度.与此同时,凝胶过滤对目的蛋白的纯化率为14.04%,蛋白含量为0.337 mg/mL,溶血活性为1519 HU/mg;镍柱亲和层析的纯化率为17.5%,蛋白含量为0.35 mg/mL.溶血活性为1463 HU/mg.由此可见,凝胶过滤得到的纯化产物在蛋白含量和蛋白活性方面丝毫不亚于镍柱亲和层析纯化试剂盒. |
| 关 键 词： | α-溶血素 凝胶过滤层析 镍柱亲和层析 |
Activity and quality comparison of the engineered protein Staphylococcus aureus α-hemolysin purified with gel filtration chromatography and Ni-NTA |
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| Haiyan Zhang,Hongjun Yang,Changfa Wang,Hongbin He,Weiming Ma,Shaohua Yang.Activity and quality comparison of the engineered protein Staphylococcus aureus α-hemolysin purified with gel filtration chromatography and Ni-NTA[J].Chinese Journal of Biotechnology,2009,25(2). | |
| Authors: | Haiyan Zhang Hongjun Yang Changfa Wang Hongbin He Weiming Ma Shaohua Yang |
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