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| 一种来源于毕赤酵母的高对映选择性羰基还原酶的性质及底物谱分析 | |
| 引用本文： | 田来强,刘卫东,陈曦,冯进辉,杨洪江,吴洽庆,朱敦明,马延和.一种来源于毕赤酵母的高对映选择性羰基还原酶的性质及底物谱分析[J].生物工程学报,2013,29(2):169-179. |
| 作者姓名： | 田来强 刘卫东 陈曦 冯进辉 杨洪江 吴洽庆 朱敦明 马延和 |
| 作者单位： | 1. 天津科技大学生物工程学院,天津300457;中国科学院天津工业生物技术研究所工业酶国家工程实验室,天津300308 2. 中国科学院天津工业生物技术研究所工业酶国家工程实验室,天津,300308 3. 天津科技大学生物工程学院,天津,300457 |
| 基金项目： | 中国科学院知识创新工程重点方向项目 (No. KSCX2-EW-G-14), 国家重点基础研究发展计划 (973计划) (No. 2011CB710801) 资助。 |
| 摘 要： | 手性醇是一类非常重要的化合物,羰基还原酶催化酮的不对称还原生成对应的手性醇.从毕赤酵母Pichia pastoris GS115基因组数据中找到一个潜在的NADPH依赖的羰基还原酶,研究毕赤酵母 P.pastoris GS115中的羰基还原酶.根据其核酸序列设计引物,从P.pastoris GS115基因组中扩增到目的基因ppcr,大肠杆菌BL21 (DE3)中表达,Ni-NTA纯化,对酶的性质和底物谱进行了研究.PPCR的最适反应温度为35℃,最适反应pH为6.0,低于45℃时有很好的稳定性.对3-甲基-2-羰基丁酸乙酯的Km和kcat分别为9.48 mmol/L和0.12 s-1. PPCR表现出广泛的底物谱和很高的对映选择性,对醛、α-酮酯、芳香族β-酮酯及芳香族酮都表现出了很好的活性,在测定的底物中,除极少数底物外,ee值均达到97％以上.因此,PPCR具有较好的应用前景. |
| 关 键 词： | 羰基还原酶 不对称还原 手性醇 毕赤酵母 |
| 收稿时间： | 2012/9/19 0:00:00 |
Biochemical characterization and substrate profile of a highly enantioselective carbonyl reductase from Pichia pastoris |
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| Laiqiang Tian,Weidong Liu,Xi Chen,Jinhui Feng,Hongjiang Yang,Qiaqing Wu,Dunming Zhu and Yanhe Ma.Biochemical characterization and substrate profile of a highly enantioselective carbonyl reductase from Pichia pastoris[J].Chinese Journal of Biotechnology,2013,29(2):169-179. | |
| Authors: | Laiqiang Tian Weidong Liu Xi Chen Jinhui Feng Hongjiang Yang Qiaqing Wu Dunming Zhu and Yanhe Ma |
| Institution: | College of Bioengineering, Tianjin University of Science and Technology, Tianjin 300457, China; National Engineering Laboratory for Industrial Enzymes, Tianjin Institute of Industrial Biotechnology, Chinese Academy of Sciences, Tianjin 300308, China;National Engineering Laboratory for Industrial Enzymes, Tianjin Institute of Industrial Biotechnology, Chinese Academy of Sciences, Tianjin 300308, China;National Engineering Laboratory for Industrial Enzymes, Tianjin Institute of Industrial Biotechnology, Chinese Academy of Sciences, Tianjin 300308, China;National Engineering Laboratory for Industrial Enzymes, Tianjin Institute of Industrial Biotechnology, Chinese Academy of Sciences, Tianjin 300308, China;College of Bioengineering, Tianjin University of Science and Technology, Tianjin 300457, China;National Engineering Laboratory for Industrial Enzymes, Tianjin Institute of Industrial Biotechnology, Chinese Academy of Sciences, Tianjin 300308, China;National Engineering Laboratory for Industrial Enzymes, Tianjin Institute of Industrial Biotechnology, Chinese Academy of Sciences, Tianjin 300308, China;National Engineering Laboratory for Industrial Enzymes, Tianjin Institute of Industrial Biotechnology, Chinese Academy of Sciences, Tianjin 300308, China |
| Abstract: | |
| Keywords: | carbonyl reductase asymmetric reduction chiral alcohol Pichia pastoris |
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